12Z

La linea cellulare 12Z è un modello immortale di cellule epiteliali endometriosiche umane derivate da lesioni endometriosiche peritoneali. È stata originariamente creata trasfettando le cellule epiteliali endometriosiche primarie con l'antigene SV40 large T, consentendo una maggiore capacità proliferativa. Le cellule 12Z sono citocheratina-positive e E-caderina-negative, il che le distingue come una popolazione simil-epiteliale con un fenotipo invasivo. È stato dimostrato che queste cellule presentano un elevato comportamento migratorio e invasivo in vitro, simile a quello delle cellule di carcinoma metastatico, ed esprimono N-caderina, una caderina associata a una maggiore invasività e motilità. Questo profilo molecolare ne supporta l'uso per studiare i meccanismi di invasione rilevanti per l'endometriosi e i paralleli visti nella biologia del cancro.

Dal punto di vista funzionale, le cellule 12Z esprimono geni coinvolti nella segnalazione di estrogeni e progesterone, nel rimodellamento della matrice extracellulare, nell'angiogenesi, nella produzione di citochine e nella biosintesi e segnalazione di prostaglandina E2 (PGE2). Esse presentano un'elevata attività delle metalloproteinasi della matrice MMP-2 e MMP-9, fondamentali per la degradazione dei componenti della matrice extracellulare e per facilitare l'invasione dei tessuti. Inoltre, le cellule 12Z producono alti livelli di PGE2, un mediatore infiammatorio implicato nella fisiopatologia dell'endometriosi. Queste caratteristiche, insieme alla loro reattività agli ormoni steroidei, rendono le cellule 12Z un modello in vitro efficace per analizzare le basi molecolari dell'insorgenza delle lesioni endometriosiche, dell'invasione e della regolazione ormonale.

È importante notare che recenti studi di controllo della qualità hanno confermato l'autenticità genetica delle cellule 12Z attraverso il profilo STR (short tandem repeat), attenuando le precedenti preoccupazioni di contaminazione incrociata e di errata identificazione nella ricerca sull'endometriosi. Queste cellule, insieme alla linea Z11 strettamente correlata, sono state proposte come modelli standard per migliorare la riproducibilità e l'affidabilità nel campo della biologia riproduttiva e della ricerca sull'endometriosi.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia