Mine otse sisu juurde
12Z
Kude
Endomeetrium, epiteel
Haigus
Endometrioos
Sünonüümid
12z, 12-Z, Z12, Z-12, Z12 Eo, EEC12Z

Dokumendid

12Z

Cell line · Toote number 305733

The 12Z cell line is an immortalized human endometriotic epithelial cell model derived from peritoneal endometriotic lesions. It was originally establishe...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

12Z rakuliin on immortaliseeritud inimese endometriootilise epiteeli rakumudel, mis on saadud peritoneaalsetest endometriootilistest kahjustustest. See loodi algselt primaarsete endometriootiliste epiteelirakkude transfekteerimisel SV40 suure T antigeeniga, mis võimaldab laiendatud proliferatiivset võimekust. 12Z rakud on tsütokeratiini-positiivsed ja E-kadheriin-negatiivsed, mis eristab neid kui epiteelilaadset populatsiooni, millel on invasiivne fenotüüp. On näidatud, et need rakud on in vitro väga migreeruvad ja invasiivsed, sarnaselt metastaatiliste karsinoomirakkudega, ning ekspresseerivad N-kadheriini, mis on seotud suurenenud invasiivsuse ja liikuvusega. See molekulaarne profiil toetab nende kasutamist endometrioosiga seotud invasioonimehhanismide uurimisel ja nende paralleele, mida on täheldatud vähibioloogias.

Funktsionaalselt ekspresseerivad 12Z rakud geene, mis on seotud östrogeeni ja progesterooni signaalimisega, rakuvälise maatriksi ümberkujundamisega, angiogeneesiga, tsütokiinide tootmisega ning prostaglandiin E2 (PGE2) biosünteesi ja signaalimisega. Neil on suurenenud maatriksi metalloproteinaaside MMP-2 ja MMP-9 aktiivsus, mis on olulised rakuvälise maatriksi komponentide lagundamisel ja koe sissetungi hõlbustamisel. Lisaks toodavad 12Z rakud suurel määral PGE2, mis on põletikuvahendaja, mida seostatakse endometrioosi patofüsioloogiaga. Need omadused koos nende tundlikkusega steroidhormoonidele muudavad 12Z rakud tõhusaks in vitro mudeliks endometriootilise kahjustuse tekke, invasiivsuse ja hormonaalse regulatsiooni molekulaarsete aluste uurimiseks.

Oluline on see, et hiljutised kvaliteedikontrolli uuringud on kinnitanud 12Z rakkude geneetilist autentsust STR (lühike tandemkordus) profiilide koostamise abil, mis leevendab endometrioosiuuringutes varasemat muret ristsaastumise ja valesti identifitseerimise pärast. Need rakud ja nendega lähedalt seotud Z11 liin on pakutud standardmudeliteks reproduktsioonibioloogia ja endometrioosi uuringute reprodutseeritavuse ja usaldusväärsuse parandamiseks.

Kude
Endomeetrium, epiteel
Haigus
Endometrioos
Sünonüümid
  • 12z
  • 12-Z
  • Z12
  • Z-12
  • Z12 Eo
  • EEC12Z

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This cell line contains an SV40 Large T Antigen expression construct delivered via a pcDNA3.1 vector, enabling extended proliferation through p53 and Rb inactivation. The insert is integrated into the human endometriotic cell line 12Z. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Epiteelirakk
Kahekordistumisaeg
31 tundi

04Tunnused

Viide
12Z (Cytioni katalooginumber 305733)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0Q73

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Külvitihedus
1–3 x 104 rakku/cm2
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
37 aastat