Preskoči na vsebino
12Z
Tkivo
Endometrij, epitelij
Bolezen
Endometrioza
Sinonimi
12z, 12-Z, Z12, Z-12, Z12 Eo, EEC12Z

Dokumenti

12Z

Cell line · Številka izdelka 305733

The 12Z cell line is an immortalized human endometriotic epithelial cell model derived from peritoneal endometriotic lesions. It was originally establishe...

€800.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija 12Z je imortaliziran model človeških endometriotičnih epitelijskih celic, pridobljenih iz peritonealnih endometriotičnih lezij. Prvotno je bila vzpostavljena s transfekcijo primarnih endometriotičnih epitelijskih celic z antigenom SV40 large T, kar je omogočilo razširjeno proliferacijsko sposobnost. Celice 12Z so pozitivne na citokeratin in negativne na E-kadherin, kar jih ločuje kot epitelijam podobno populacijo z invazivnim fenotipom. Pokazalo se je, da imajo te celice in vitro visoko migracijsko in invazivno vedenje, podobno kot celice metastatskega karcinoma, in izražajo N-kadherin, kadherin, povezan s povečano invazivnostjo in gibljivostjo. Ta molekularni profil podpira njihovo uporabo pri preučevanju invazivnih mehanizmov, pomembnih za endometriozo, in vzporednic, ki se pojavljajo v biologiji raka.

Funkcionalno celice 12Z izražajo gene, ki sodelujejo pri signalizaciji estrogena in progesterona, preoblikovanju zunajceličnega matriksa, angiogenezi, proizvodnji citokinov ter biosintezi in signalizaciji prostaglandina E2 (PGE2). Izkazujejo povečano aktivnost matriks metaloproteinaz MMP-2 in MMP-9, ki sta ključni za razgradnjo sestavin zunajceličnega matriksa in omogočanje invazije v tkiva. Poleg tega celice 12Z proizvajajo visoke ravni PGE2, vnetnega mediatorja, ki je vključen v patofiziologijo endometrioze. Zaradi teh lastnosti in njihove odzivnosti na steroidne hormone so celice 12Z učinkovit in vitro model za raziskovanje molekularnih osnov nastanka endometriotičnih lezij, invazije in hormonske regulacije.

Pomembno je, da so nedavne študije nadzora kakovosti potrdile genetsko pristnost celic 12Z s profiliranjem STR (kratke tandemske ponovitve), kar zmanjšuje prejšnjo zaskrbljenost zaradi navzkrižne kontaminacije in napačne identifikacije pri raziskavah endometrioze. Te celice so bile skupaj s tesno povezano linijo Z11 predlagane kot standardni modeli za izboljšanje ponovljivosti in zanesljivosti na področju reproduktivne biologije in raziskav endometrioze.

Tkivo
Endometrij, epitelij
Bolezen
Endometrioza
Sinonimi
  • 12z
  • 12-Z
  • Z12
  • Z-12
  • Z12 Eo
  • EEC12Z

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This cell line contains an SV40 Large T Antigen expression construct delivered via a pcDNA3.1 vector, enabling extended proliferation through p53 and Rb inactivation. The insert is integrated into the human endometriotic cell line 12Z. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Vrsta celice
Epitelijska celica
Čas podvojitve
31 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
12Z (kataloška številka Cytion 305733)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0Q73

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Gostota setve
1–3 x 104 celic/cm2
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
37 let