Gå til innholdet
12Z
Vev
Endometrium, epitel
Sykdom
Endometriose
Synonymer
12z, 12-Z, Z12, Z-12, Z12 Eo, EEC12Z

Dokumenter

12Z

Cell line · Produktnummer 305733

The 12Z cell line is an immortalized human endometriotic epithelial cell model derived from peritoneal endometriotic lesions. It was originally establishe...

€800.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

12Z-cellelinjen er en udødeliggjort human endometriotisk epitelcellemodell avledet fra peritoneale endometriotiske lesjoner. Den ble opprinnelig etablert ved å transfektere primære endometriotiske epitelceller med SV40 large T-antigenet, noe som muliggjorde utvidet proliferativ kapasitet. 12Z-cellene er cytokeratin-positive og E-cadherin-negative, noe som skiller dem ut som en epitel-lignende populasjon med en invasiv fenotype. Disse cellene har vist seg å ha høy migrasjons- og invasivitetsevne in vitro, i likhet med metastatiske karsinomceller, og uttrykker N-cadherin, et cadherin som er forbundet med økt invasivitet og motilitet. Denne molekylære profilen støtter deres bruk i studier av invasjonsmekanismer som er relevante for endometriose, og har paralleller i kreftbiologien.

Funksjonelt uttrykker 12Z-celler gener som er involvert i østrogen- og progesteronsignalering, remodellering av ekstracellulær matriks, angiogenese, cytokinproduksjon og biosyntese og signalering av prostaglandin E2 (PGE2). De viser forhøyet aktivitet av matriksmetalloproteinasene MMP-2 og MMP-9, som er avgjørende for nedbrytning av ekstracellulære matrikskomponenter og fremmer vevsinvasjon. I tillegg produserer 12Z-celler høye nivåer av PGE2, en inflammatorisk mediator som er involvert i patofysiologien ved endometriose. Disse egenskapene, sammen med deres respons på steroidhormoner, gjør 12Z-celler til en effektiv in vitro-modell for dissekering av det molekylære grunnlaget for etablering av endometriose-lesjoner, invasjon og hormonell regulering.

Det er viktig å merke seg at nyere kvalitetskontrollstudier har bekreftet 12Z-cellenes genetiske autentisitet ved hjelp av STR-profilering (korte tandemrepetisjoner), noe som har redusert tidligere bekymringer om krysskontaminering og feilidentifisering i endometrioseforskningen. Disse cellene, sammen med den nært beslektede Z11-linjen, har blitt foreslått som standardmodeller for å forbedre reproduserbarheten og påliteligheten innen reproduksjonsbiologi og endometrioseforskning.

Vev
Endometrium, epitel
Sykdom
Endometriose
Synonymer
  • 12z
  • 12-Z
  • Z12
  • Z-12
  • Z12 Eo
  • EEC12Z

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This cell line contains an SV40 Large T Antigen expression construct delivered via a pcDNA3.1 vector, enabling extended proliferation through p53 and Rb inactivation. The insert is integrated into the human endometriotic cell line 12Z. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitelcelle
Fordoblingstid
31 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
12Z (Cytion-katalognummer 305733)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0Q73

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Såtetthet
1-3 x 104 celler/cm2
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
37 år