12Z

12Z-cellelinjen er en udødeliggjort human endometriotisk epitelcellemodel, der stammer fra peritoneale endometriotiske læsioner. Den blev oprindeligt etableret ved at transfektere primære endometriotiske epitelceller med SV40 large T-antigenet, hvilket muliggjorde en udvidet proliferativ kapacitet. 12Z-cellerne er cytokeratin-positive og E-cadherin-negative, hvilket kendetegner dem som en epitel-lignende population med en invasiv fænotype. Disse celler har vist sig at udvise høj migrations- og invasiv adfærd in vitro, svarende til metastatiske karcinomceller, og udtrykker N-cadherin, et cadherin, der er forbundet med øget invasivitet og motilitet. Denne molekylære profil understøtter deres anvendelse i studiet af invasionsmekanismer, der er relevante for endometriose og paralleller set i kræftbiologi.

Funktionelt udtrykker 12Z-celler gener, der er involveret i østrogen- og progesteronsignalering, ekstracellulær matrixombygning, angiogenese, cytokinproduktion og prostaglandin E2 (PGE2)-biosyntese og -signalering. De udviser forhøjet aktivitet af matrixmetalloproteinaser MMP-2 og MMP-9, som er afgørende for nedbrydning af ekstracellulære matrixkomponenter og fremmer vævsinvasion. Desuden producerer 12Z-celler høje niveauer af PGE2, en inflammatorisk mediator, der er involveret i patofysiologien ved endometriose. Disse egenskaber sammen med deres reaktion på steroidhormoner gør 12Z-celler til en effektiv in vitro-model til dissekering af det molekylære grundlag for etablering af endometriotiske læsioner, invasion og hormonel regulering.

Det er vigtigt, at nylige kvalitetskontrolundersøgelser har bekræftet 12Z-cellernes genetiske ægthed gennem STR-profilering (short tandem repeat), hvilket mindsker tidligere bekymringer om krydskontaminering og fejlidentifikation i endometrioseforskningen. Disse celler er sammen med den nært beslægtede Z11-linje blevet foreslået som standardmodeller for at forbedre reproducerbarheden og pålideligheden inden for reproduktionsbiologi og endometrioseforskning.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring