12Z

La línea celular 12Z es un modelo de células epiteliales endometriósicas humanas inmortalizadas, derivadas de lesiones endometriósicas peritoneales. Se estableció originalmente mediante la transfección de células epiteliales endometriósicas primarias con el antígeno T grande del SV40, lo que les otorgó una capacidad proliferativa prolongada. Las células 12Z son positivas para citoqueratina y negativas para E-cadherina, lo que las distingue como una población de tipo epitelial con un fenotipo invasivo. Se ha demostrado que estas células exhiben un alto comportamiento migratorio e invasivo in vitro, similar al de las células de carcinoma metastásico, y expresan N-cadherina, una cadherina asociada con una mayor invasividad y motilidad. Este perfil molecular respalda su uso en el estudio de los mecanismos de invasión relevantes para la endometriosis y los paralelismos observados en la biología del cáncer.

Desde el punto de vista funcional, las células 12Z expresan genes involucrados en la señalización del estrógeno y la progesterona, la remodelación de la matriz extracelular, la angiogénesis, la producción de citocinas y la biosíntesis y señalización de la prostaglandina E2 (PGE2). Muestran una actividad elevada de las metaloproteinasas de la matriz MMP-2 y MMP-9, que son fundamentales para degradar los componentes de la matriz extracelular y facilitar la invasión tisular. Además, las células 12Z producen altos niveles de PGE2, un mediador inflamatorio implicado en la fisiopatología de la endometriosis. Estas características, junto con su capacidad de respuesta a las hormonas esteroides, convierten a las células 12Z en un modelo in vitro eficaz para analizar los fundamentos moleculares del establecimiento, la invasión y la regulación hormonal de las lesiones endometriósicas.

Es importante destacar que estudios recientes de control de calidad han confirmado la autenticidad genética de las células 12Z mediante el perfil de STR (repeticiones en tándem cortas), lo que mitiga las preocupaciones anteriores sobre la contaminación cruzada y la identificación errónea en la investigación sobre la endometriosis. Estas células, junto con la línea Z11, estrechamente relacionada, se han propuesto como modelos estándar para mejorar la reproducibilidad y la confiabilidad en el campo de la biología reproductiva y la investigación sobre la endometriosis.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.