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D283Med
Tissue
Cerveau
Disease
Médulloblastome
Synonyms
D283 Med, D283 MED, D283-MED, D283_Med, D-283 Med, D-283MED, D283MED, D283-Med, D-283, D283, Med 283, H283

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D283Med

Cell line · Product number 300330

The D283Med cell line is a human medulloblastoma cell line that was derived from the cerebellum of a 6-year-old male. Medulloblastoma is a type of primiti...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
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Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La lignée cellulaire D283Med est une lignée cellulaire humaine de médulloblastome issue du cervelet d’un garçon de 6 ans. Le médulloblastome est un type de tumeur neuroectodermique primitive qui touche principalement les enfants et qui se situe dans le cervelet, la partie du cerveau responsable du contrôle moteur et de la coordination. Les cellules D283Med sont largement utilisées dans la recherche en oncologie, en particulier dans les études axées sur la biologie et la pharmacologie des médulloblastomes.

Cette lignée cellulaire présente un mode de croissance adhérent et a été largement utilisée pour explorer les voies moléculaires impliquées dans la pathogenèse du médulloblastome, telles que les voies de signalisation Sonic Hedgehog (SHH) et WNT, connues pour jouer un rôle important dans le développement et la progression de ces tumeurs. Les chercheurs utilisent la lignée D283Med pour évaluer l’efficacité thérapeutique et la résistance aux traitements, étudier les profils d’expression génique et explorer de nouvelles cibles thérapeutiques. La croissance robuste de cette lignée et ses caractéristiques génétiques typiques du médulloblastome en font un modèle précieux pour les études précliniques visant à comprendre la biologie tumorale et à tester des médicaments anticancéreux.

De plus, les cellules D283Med sont utilisées dans des études génétiques pour comprendre l’impact des mutations et évaluer les mécanismes de métastase et de récidive dans le médulloblastome. Elles constituent un outil essentiel pour l’étude des processus oncogéniques au niveau cellulaire, contribuant ainsi de manière significative au développement de thérapies ciblées pour cette tumeur cérébrale pédiatrique agressive.

Tissue
Cerveau
Disease
Médulloblastome
Applications
Culture cellulaire en 3D, neurosciences
Synonyms
  • D283 Med
  • D283 MED
  • D283-MED
  • D283_Med
  • D-283 Med
  • D-283MED
  • D283MED
  • D283-Med
  • D-283
  • D283
  • Med 283
  • H283

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent and suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Épithélial
Tumourigenic
Oui, chez les souris nues
Karyotype
Le caryotype est 45, xY, -7, -8, -17, -20, der(20)t(1,20)(q12,q13), 8q+, 17p+ (plage = 41 à 46). Il s’agit d’une lignée cellulaire hypodiploïde présentant une fréquence de ploidies supérieures de 5,4 %. Trois chromosomes marqueurs sont présents dans toutes les cellules. Il s’agit de : der(20)t(1,20)(q12,q13), 8q+ et 17p+. Les chromosomes N7, N17 et N20 sont présents en un seul exemplaire. Le chromosome X unique est structurellement normal, et la présence du chromosome Y est confirmée par microscopie à fluorescence.

04Identifiers

Citation
D283Med (numéro de catalogue Cytion 300330)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1155

05Expression and susceptibility

Protein expression
Positif pour la glutamine synthétase, positif pour l'énolase spécifique des neurones, négatif pour les protéines acides fibrillaires gliales, négatif pour la protéine S100 (S-100)
Isoenzymes
AK-1, 1, ES-D, 1, G6PD, B, GLO-I, 2, Me-2, 0, PGM1, 1, PGM3, 1

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), contenant : 2 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO₃, et EBSS (référence Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter au milieu 10 % de FBS et 1 % de NEAA
Subculturing
Recueillir les cellules en suspension dans un tube de 15 ml et rincer soigneusement les cellules adhérentes à l’aide de PBS sans calcium ni magnésium (3 à 5 ml de PBS pour les flacons de culture T25, 5 à 10 ml pour les flacons de culture T75). Ajouter de l’Accutase (1 à 2 ml par flacon de culture T25, 2,5 ml par flacon de culture T75); la couche cellulaire doit être entièrement recouverte. Incuber à température ambiante pendant 10 minutes, puis centrifuger ensemble les cellules en suspension et les cellules adhérentes. Remettre soigneusement les cellules en suspension et les répartir dans de nouveaux flacons contenant du milieu frais.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Donor age
6 ans
Ethnicity
européen