Skip to content
D283Med
Tissue
สมอง
Disease
เมดุลโลบลาสโตมา
Synonyms
D283 Med, D283 MED, D283-MED, D283_Med, D-283 Med, D-283MED, D283MED, D283-Med, D-283, D283, Med 283, H283

Documents

D283Med

Cell line · Product number 300330

The D283Med cell line is a human medulloblastoma cell line that was derived from the cerebellum of a 6-year-old male. Medulloblastoma is a type of primiti...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ D283Med เป็นเซลล์ไลน์มะเร็งเมดุลโลบลาสโตมาของมนุษย์ที่ได้มาจากสมองน้อยของเด็กชายอายุ 6 ปี เมดุลโลบลาสโตมาเป็นชนิดของเนื้องอกประสาทต้นกำเนิดที่พบในเด็กเป็นหลักและตั้งอยู่ในสมองน้อย ซึ่งเป็นส่วนของสมองที่รับผิดชอบการควบคุมการเคลื่อนไหวและการประสานงานเซลล์ D283Med ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยด้านมะเร็งวิทยา โดยเฉพาะในงานวิจัยที่มุ่งเน้นชีววิทยาและเภสัชวิทยาของเนื้องอกมะเร็งสมองชนิดเมดูโลบลาสโตมา

เซลล์ไลน์นี้แสดงรูปแบบการเจริญเติบโตแบบเกาะติดและถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในการศึกษาเส้นทางโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับการเกิดโรคเมดัลโลบลาสโตมา เช่น เส้นทางสัญญาณโซนิคเฮดจ์ฮอก (SHH) และ WNT ซึ่งเป็นที่ทราบกันดีว่ามีบทบาทสำคัญในการพัฒนาและการลุกลามของเนื้องอกเหล่านี้นักวิจัยใช้สายพันธุ์ D283Med เพื่อประเมินประสิทธิภาพการรักษาและความต้านทาน, ศึกษาโปรไฟล์การแสดงออกของยีน, และสำรวจเป้าหมายการรักษาใหม่ ๆ การเจริญเติบโตที่แข็งแกร่งและลักษณะทางพันธุกรรมของเนื้องอกเมดูโลบลาสโตมาที่เป็นแบบฉบับของสายพันธุ์นี้ ทำให้มันเป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาในระยะก่อนคลินิกที่มุ่งเน้นไปที่การทำความเข้าใจชีววิทยาของเนื้องอกและการทดสอบยาต้านมะเร็ง

นอกจากนี้ เซลล์ D283Med ยังถูกนำมาใช้ในการศึกษาทางพันธุกรรมเพื่อทำความเข้าใจผลกระทบของการกลายพันธุ์และประเมินกลไกการแพร่กระจายและการกลับมาเป็นซ้ำของมะเร็งเมดัลโลบลาสโตมา เซลล์เหล่านี้เป็นเครื่องมือสำคัญในการศึกษาการเกิดมะเร็งในระดับเซลล์ ซึ่งมีส่วนช่วยอย่างมากในการพัฒนาวิธีการรักษาแบบมุ่งเป้าสำหรับมะเร็งสมองในเด็กชนิดรุนแรงนี้

Tissue
สมอง
Disease
เมดุลโลบลาสโตมา
Applications
การเพาะเลี้ยงเซลล์แบบสามมิติ, ประสาทวิทยาศาสตร์
Synonyms
  • D283 Med
  • D283 MED
  • D283-MED
  • D283_Med
  • D-283 Med
  • D-283MED
  • D283MED
  • D283-Med
  • D-283
  • D283
  • Med 283
  • H283

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent and suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่ไม่มีขน
Karyotype
คาร์โยไทป์คือ 45, xY, -7, -8, -17, -20, der(20)t(1,20)(q12,q13), 8q+, 17p+ (ช่วง = 41 ถึง 46) นี่คือเซลล์ไลน์ที่มีจำนวนโครโมโซมต่ำกว่าปกติ (hypodiploid) โดยมีอัตราส่วนของเซลล์ที่มีจำนวนโครโมโซมสูงกว่าปกติ (higher ploidies) อยู่ที่ 5.4%โครโมโซมเครื่องหมายสามตัวมีอยู่ในทุกเซลล์ ได้แก่ der(20)t(1,20)(q12,q13), 8q+ และ 17p+ N7, N17 และ N20 มีสำเนาเดียว โครโมโซม x เดี่ยวมีโครงสร้างปกติ และโครโมโซม Y มีอยู่ตามที่ยืนยันโดยการตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์

04Identifiers

Citation
D283Med (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300330)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1155

05Expression and susceptibility

Protein expression
ผลบวกต่อกลูตามีนซินเทเทส, ผลบวกต่อเอนอลาสเฉพาะเซลล์ประสาท, ผลลบต่อโปรตีนกรดไฟบริลลารีของเซลล์เกลีย, ผลลบต่อโปรตีน S100 (S-100)
Isoenzymes
AK-1, 1, ES-D, 1, G6PD, B, GLO-I, 2, Me-2, 0, PGM1, 1, PGM3, 1

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Subculturing
เก็บเซลล์ที่ลอยในหลอดขนาด 15 มล. และล้างเซลล์ที่ติดอยู่โดยใช้ PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียมอย่างระมัดระวัง (3-5 มล. PBS สำหรับขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ T25, 5-10 มล. สำหรับขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ T75)เติม Accutase (1-2 มล. ต่อ T25, 2.5 มล. ต่อ T75) ให้ครอบคลุมแผ่นเซลล์ทั้งหมด ทำการบ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 นาที จากนั้นปั่นเหวี่ยงเซลล์ที่ลอยอยู่ในสารละลายและเซลล์ที่เกาะติดกันรวมกัน ทำการแขวนเซลล์อย่างระมัดระวังและแบ่งใส่ลงในขวดใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์สด
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
6 ปี
Ethnicity
ยุโรป