Премини към съдържанието
D283Med
Тъкан
Мозък
Заболяване
Медулобластом
Синоними
D283 Med, D283 MED, D283-MED, D283_Med, D-283 Med, D-283MED, D283MED, D283-Med, D-283, D283, Med 283, H283

Документи

D283Med

Cell line · Номер на продукта 300330

The D283Med cell line is a human medulloblastoma cell line that was derived from the cerebellum of a 6-year-old male. Medulloblastoma is a type of primiti...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия D283Med е човешка клетъчна линия на медулобластом, получена от малкия мозък на 6-годишен мъж. Медулобластомът е вид примитивен невроектодермален тумор, който засяга предимно деца и се намира в малкия мозък, частта от мозъка, отговорна за двигателния контрол и координацията. Клетките D283Med се използват широко в онкологичните изследвания, особено в проучвания, насочени към биологията и фармакологията на медулобластомите.

Тази клетъчна линия се характеризира с адхезивен модел на растеж и се използва широко за изследване на молекулярните пътища, участващи в патогенезата на медулобластома, като например сигналните пътища Sonic Hedgehog (SHH) и WNT, за които е известно, че играят важна роля в развитието и прогресията на тези тумори. Изследователите използват линията D283Med за оценка на терапевтичната ефикасност и резистентност, за изучаване на профилите на генна експресия и за проучване на нови терапевтични цели. Силният растеж на линията и типичните генетични характеристики на медулобластома я превръщат в ценен модел за предклинични изследвания, насочени към разбиране на туморната биология и тестване на противоракови лекарства.

Освен това клетките на D283Med се използват в генетични изследвания, за да се разбере влиянието на мутациите и да се оценят механизмите на метастазиране и рецидивиране при медулобластома. Те предоставят важен инструмент за изследване на онкогенните процеси на клетъчно ниво, като по този начин допринасят значително за разработването на целеви терапии за този агресивен детски мозъчен тумор.

Тъкан
Мозък
Заболяване
Медулобластом
Приложения
3D клетъчна култура, Неврология
Синоними
  • D283 Med
  • D283 MED
  • D283-MED
  • D283_Med
  • D-283 Med
  • D-283MED
  • D283MED
  • D283-Med
  • D-283
  • D283
  • Med 283
  • H283

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Адхезивен и суспензионен
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Епителиален
Туморогенен
Да, при голи мишки
Кариотип
Кариотипът е 45, xY, -7, -8, -17, -20, der(20)t(1,20)(q12,q13), 8q+, 17p+ (диапазон = 41 до 46). Това е хиподиплоидна клетъчна линия с честота на по-високите плоиди от 5,4 %. Три маркерни хромозоми присъстват във всички клетки. Те са: der(20)t(1,20)(q12,q13), 8q+ и 17p+. N7, N17 и N20 имат единични копия. Единичният х е структурно нормален, а Y хромозомата е налице, както се потвърждава от флуоресцентна микроскопия.

04Идентификатори

Източник
D283Med (каталожен номер 300330 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1155

05Проява и предразположеност

Експресия на протеини
Положителен резултат за глутамин синтетаза, положителен резултат за неврон специфична енолаза, отрицателен резултат за глиални фибриларни киселинни протеини, отрицателен резултат за S100 (S-100) протеин
Изоензими
AK-1, 1, ES-D, 1, G6PD, B, GLO-I, 2, Me-2, 0, PGM1, 1, PGM3, 1

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS и 1% NEAA
Пресаждане
Съберете суспендираните клетки в 15-милилитрова епруветка и внимателно изплакнете прилепналите клетки, като използвате PBS без калций и магнезий (3-5 ml PBS за колби за клетъчни култури Т25, 5-10 ml за колби за клетъчни култури Т75). Добавете Accutase (1-2 ml за T25, 2,5 ml за колба за клетъчни култури T75), като клетъчният лист трябва да бъде покрит напълно. Инкубирайте при стайна температура в продължение на 10 минути, след което центрофугирайте клетките, растящи в суспензия, и прилепналите клетки заедно. Внимателно ресуспендирайте клетките и ги разпределете в нови колби, които съдържат прясна среда.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
6 години
Етническа принадлежност
Европейски