Skip to content
D283Med
Tissue
מוח
Disease
מדולובלסטומה
Synonyms
D283 Med, D283 MED, D283-MED, D283_Med, D-283 Med, D-283MED, D283MED, D283-Med, D-283, D283, Med 283, H283

Documents

D283Med

Cell line · Product number 300330

The D283Med cell line is a human medulloblastoma cell line that was derived from the cerebellum of a 6-year-old male. Medulloblastoma is a type of primiti...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים D283Med הוא קו תאים של מדולובלסטומה אנושית, שמקורו במוח הקטן של ילד בן 6. מדולובלסטומה היא סוג של גידול נוירואקטודרמלי פרימיטיבי, הפוגע בעיקר בילדים וממוקם במוח הקטן, החלק במוח האחראי על בקרת תנועה ותיאום. תאי D283Med נמצאים בשימוש נרחב במחקר אונקולוגי, במיוחד במחקרים המתמקדים בביולוגיה ובפרמקולוגיה של מדולובלסטומות.

קו תאים זה מציג דפוס צמיחה דבקני, והוא משמש רבות לחקר המסלולים המולקולריים המעורבים בפתוגנזה של מדולובלסטומה, כגון מסלולי האיתות Sonic Hedgehog (SHH) ו-WNT, הידועים כמשחקים תפקיד משמעותי בהתפתחות ובהתקדמות של גידולים אלה. חוקרים משתמשים בקו D283Med כדי להעריך את היעילות והעמידות הטיפולית, לחקור פרופילים של ביטוי גנים ולחקור מטרות טיפוליות חדשות. הצמיחה החזקה של הקו ותכונותיו הגנטיות האופייניות למדולובלסטומה הופכות אותו למודל חשוב למחקרים פרה-קליניים שמטרתם להבין את הביולוגיה של הגידול ולבדוק תרופות נגד סרטן.

יתר על כן, תאי D283Med משמשים במחקרים גנטיים להבנת ההשפעה של מוטציות ולהערכת מנגנוני גרורות והישנות במדולובלסטומה. הם מספקים כלי חיוני לחקר תהליכים אונקוגניים ברמה התאית, ובכך תורמים באופן משמעותי לפיתוח טיפולים ממוקדים לגידול מוחי אגרסיבי זה בילדים.

Tissue
מוח
Disease
מדולובלסטומה
Applications
תרבות תאים תלת-ממדית, מדעי המוח
Synonyms
  • D283 Med
  • D283 MED
  • D283-MED
  • D283_Med
  • D-283 Med
  • D-283MED
  • D283MED
  • D283-Med
  • D-283
  • D283
  • Med 283
  • H283

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent and suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
אפיתל
Tumourigenic
כן, בעכברים עירומים
Karyotype
הקריוטיפ הוא 45, xY, -7, -8, -17, -20, der(20)t(1,20)(q12,q13), 8q+, 17p+ (טווח = 41 עד 46). זהו קו תאים היפודיפלואידי עם תדירות של פלואידיות גבוהות יותר של 5.4%. בכל התאים קיימים שלושה כרומוזומים סמנים. הם: der(20)t(1,20)(q12,q13), 8q+ ו-17p+. N7, N17 ו-N20 הם עותקים בודדים. ה-x הבודד הוא מבחינה מבנית נורמלי, והכרומוזום Y קיים, כפי שאושר באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי.

04Identifiers

Citation
D283Med (מספר קטלוגי Cytion 300330)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1155

05Expression and susceptibility

Protein expression
גלוטמין סינתטאז חיובי, אנולאז ספציפי לנוירונים חיובי, חלבונים חומציים פיברילריים גליאליים שליליים, חלבון S100 (S-100) שלילי
Isoenzymes
AK-1, 1, ES-D, 1, G6PD, B, GLO-I, 2, Me-2, 0, PGM1, 1, PGM3, 1

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
Subculturing
אסוף תאי תרבית בתא 15 מ"ל ושטוף בזהירות את התאים הנצמדים באמצעות PBS ללא סידן ומגנזיום (3-5 מ"ל PBS עבור T25, 5-10 מ"ל עבור צלוחיות תרבית תאים T75). הוסף Accutase (1-2 מ"ל לכל T25, 2.5 מ"ל לכל צלחת תרבית תאים T75), יש לכסות את כל שכבת התאים. דגיר בטמפרטורת החדר למשך 10 דקות, ולאחר מכן סובב את התאים הגדלים בתמיסה ואת התאים הנצמדים יחד. השב את התאים לתמיסה בזהירות והעבר אותם לצלחות חדשות המכילות מדיום טרי.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
6 שנים
Ethnicity
אירופאי