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D283Med
Pañuelo de papel
Cerebro
Enfermedad
Meduloblastoma
Sinónimos
D283 Med, D283 MED, D283-MED, D283_Med, D-283 Med, D-283MED, D283MED, D283-Med, D-283, D283, Med 283, H283

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D283Med

Cell line · Número de producto 300330

The D283Med cell line is a human medulloblastoma cell line that was derived from the cerebellum of a 6-year-old male. Medulloblastoma is a type of primiti...

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01Información general

Descripción

La línea celular D283Med es una línea celular de meduloblastoma humano derivada del cerebelo de un varón de 6 años. El meduloblastoma es un tipo de tumor neuroectodérmico primitivo que afecta principalmente a niños y se localiza en el cerebelo, la parte del cerebro responsable del control motor y la coordinación. Las células D283Med se utilizan ampliamente en la investigación oncológica, sobre todo en estudios centrados en la biología y farmacología de los meduloblastomas.

Esta línea celular presenta un patrón de crecimiento adherente y se ha utilizado ampliamente para explorar las vías moleculares implicadas en la patogénesis del meduloblastoma, como las vías de señalización Sonic Hedgehog (SHH) y WNT, que se sabe que desempeñan un papel importante en el desarrollo y la progresión de estos tumores. Los investigadores utilizan la línea D283Med para evaluar la eficacia terapéutica y la resistencia, estudiar los perfiles de expresión génica y explorar nuevas dianas terapéuticas. El crecimiento robusto de la línea y las características genéticas típicas del meduloblastoma la convierten en un modelo valioso para estudios preclínicos destinados a comprender la biología del tumor y probar fármacos contra el cáncer.

Además, las células D283Med se utilizan en estudios genéticos para comprender el impacto de las mutaciones y evaluar los mecanismos de metástasis y recurrencia en el meduloblastoma. Proporcionan una herramienta crucial para la investigación de procesos oncogénicos a nivel celular, contribuyendo así significativamente al desarrollo de terapias dirigidas para este agresivo tumor cerebral pediátrico.

Pañuelo de papel
Cerebro
Enfermedad
Meduloblastoma
Aplicaciones
cultivo celular 3D, Neurociencia
Sinónimos
  • D283 Med
  • D283 MED
  • D283-MED
  • D283_Med
  • D-283 Med
  • D-283MED
  • D283MED
  • D283-Med
  • D-283
  • D283
  • Med 283
  • H283

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente y en suspensión
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Epitelial
Tumorigénico
Sí, en ratones desnudos
Cariotipo
El cariotipo es 45, xY, -7, -8, -17, -20, der(20)t(1,20)(q12,q13), 8q+, 17p+ (rango = 41 a 46). Se trata de una línea celular hipodiploide con una frecuencia de ploidías superiores del 5,4%. Tres cromosomas marcadores están presentes en todas las células. Son: der(20)t(1,20)(q12,q13), 8q+ y 17p+. N7, N17 y N20 tienen copias únicas. La x única es estructuralmente normal, y el cromosoma Y está presente, como confirma la microscopía de fluorescencia.

04Identificadores

Referencia
D283Med (número de catálogo 300330 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1155

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de proteínas
Glutamina sintetasa positiva, enolasa neuronal específica positiva, proteínas ácidas fibrilares gliales negativas, proteína S100 (S-100) negativa
Isoenzimas
AK-1, 1, ES-D, 1, G6PD, B, GLO-I, 2, Me-2, 0, PGM1, 1, PGM3, 1

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con un 10% de FBS y un 1% de NEAA
Subcultivo
Recoger las células en suspensión en un tubo de 15 ml y enjuagar cuidadosamente las células adherentes con PBS sin calcio ni magnesio (3-5 ml de PBS para T25, 5-10 ml para matraces de cultivo celular T75). Añadir Accutase (1-2ml por T25, 2,5ml por matraz de cultivo celular T75), la lámina celular debe cubrirse completamente. Incubar a temperatura ambiente durante 10 minutos y, a continuación, centrifugar juntas las células que crecen en suspensión y las células adherentes. Resuspender cuidadosamente las células y dispensarlas en nuevos matraces que contengan medio fresco.
Descongelación y cultivo

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
6 años
Origen étnico
Europea