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D283Med
Tissue
大脑
Disease
髓母细胞瘤
Synonyms
D283 Med, D283 MED, D283-MED, D283_Med, D-283 Med, D-283MED, D283MED, D283-Med, D-283, D283, Med 283, H283

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D283Med

Cell line · Product number 300330

The D283Med cell line is a human medulloblastoma cell line that was derived from the cerebellum of a 6-year-old male. Medulloblastoma is a type of primiti...

US$395.00excl. tax and shipping
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  • CoA
1

01General information

Description

D283Med 细胞系是一种人类髓母细胞瘤细胞系,来源于一名 6 岁男性的小脑。髓母细胞瘤是一种主要影响儿童的原始神经外胚层肿瘤,位于小脑,即大脑中负责运动控制和协调的部分。D283Med 细胞被广泛用于肿瘤研究,尤其是髓母细胞瘤的生物学和药理学研究。

这种细胞系具有粘附生长模式,已被广泛用于探索髓母细胞瘤发病机制中的分子通路,如音速刺猬(SHH)和 WNT 信号通路。研究人员利用 D283Med 株系评估疗效和耐药性,研究基因表达谱,并探索新的治疗靶点。该品系生长旺盛,具有典型的髓母细胞瘤遗传特征,是了解肿瘤生物学和测试抗癌药物的临床前研究的重要模型。

此外,D283Med 细胞还被用于基因研究,以了解突变的影响,评估髓母细胞瘤的转移和复发机制。它们为研究细胞水平的致癌过程提供了重要工具,从而为开发针对这种侵袭性小儿脑瘤的靶向疗法做出了重大贡献。

Tissue
大脑
Disease
髓母细胞瘤
Applications
三维细胞培养、神经科学
Synonyms
  • D283 Med
  • D283 MED
  • D283-MED
  • D283_Med
  • D-283 Med
  • D-283MED
  • D283MED
  • D283-Med
  • D-283
  • D283
  • Med 283
  • H283

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent and suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
上皮细胞
Tumourigenic
是,在裸鼠身上
Karyotype
核型为 45、xY、-7、-8、-17、-20、der(20)t(1,20)(q12,q13)、8q+、17p+(范围 = 41 至 46)。这是一个低二倍体细胞系,高倍性频率为 5.4%。所有细胞中都有三条标记染色体。它们是:der(20)t(1,20)(q12,q13)、8q+ 和 17p+。N7、N17和N20都是单拷贝。单 x 结构正常,荧光显微镜证实 Y 染色体存在。

04Identifiers

Citation
D283Med(Cytion 目录号 300330)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1155

05Expression and susceptibility

Protein expression
谷氨酰胺合成酶阳性、神经元特异性烯醇化酶阳性、胶质纤维酸性蛋白阴性、S100(S-100)蛋白阴性
Isoenzymes
AK-1,1,ES-D,1,G6PD,B,GLO-I,2,Me-2,0,PGM1,1,PGM3,1

06Handling and culture

Culture medium
EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, 加湿环境。

Supplements
在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA
Subculturing
用 15 毫升试管收集悬浮细胞,用不含钙和镁的 PBS(T25 细胞培养皿用 3-5 毫升 PBS,T75 细胞培养皿用 5-10 毫升)仔细冲洗粘附的细胞。加入 Accutase(每个 T25 细胞培养瓶 1-2 毫升,每个 T75 细胞培养瓶 2.5 毫升),细胞片必须完全覆盖。在环境温度下孵育 10 分钟,然后将悬浮生长的细胞和粘附的细胞一起离心。小心重悬细胞并将其分装到装有新鲜培养基的新培养瓶中。
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。

Freeze medium
我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
Storage conditions

如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

Shipping conditions

冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

08Donor

Donor age
6 年
Ethnicity
欧洲