Tartalomra ugrás
D283Med
Szövet
Agy
Betegség
Medulloblastoma
Szinonimák
D283 Med, D283 MED, D283-MED, D283_Med, D-283 Med, D-283MED, D283MED, D283-Med, D-283, D283, Med 283, H283

Dokumentumok

D283Med

Cell line · Termékszám 300330

The D283Med cell line is a human medulloblastoma cell line that was derived from the cerebellum of a 6-year-old male. Medulloblastoma is a type of primiti...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A D283Med sejtvonal egy humán medulloblastoma sejtvonal, amelyet egy 6 éves férfi kisagyából nyertek. A medulloblastoma a primitív neuroektodermális tumor egy típusa, amely elsősorban gyermekeket érint, és a kisagyban, az agynak a motoros irányításért és koordinációért felelős részében található. A D283Med sejteket széles körben használják az onkológiai kutatásokban, különösen a medulloblastomák biológiájára és farmakológiájára összpontosító vizsgálatokban.

Ez a sejtvonal adherens növekedési mintázatot mutat, és széles körben használták a medulloblastoma patogenezisében szerepet játszó molekuláris útvonalak, például a Sonic Hedgehog (SHH) és a WNT jelátviteli útvonalak feltárására, amelyekről ismert, hogy jelentős szerepet játszanak e daganatok kialakulásában és progressziójában. A kutatók a D283Med vonalat a terápiás hatékonyság és rezisztencia értékelésére, génexpressziós profilok tanulmányozására és új terápiás célpontok feltárására használják. A vonal robusztus növekedése és tipikus medulloblastoma genetikai jellemzői értékes modellé teszik a tumor biológiájának megértését és a rákellenes gyógyszerek tesztelését célzó preklinikai vizsgálatokhoz.

A D283Med sejteket továbbá genetikai vizsgálatokban is felhasználják a mutációk hatásának megértésére, valamint a medulloblastoma metasztázis- és kiújulási mechanizmusainak értékelésére. A sejtek kulcsfontosságú eszközt jelentenek az onkogén folyamatok sejtszintű vizsgálatához, ezáltal jelentősen hozzájárulnak az agresszív gyermekkori agydaganat célzott terápiáinak kifejlesztéséhez.

Szövet
Agy
Betegség
Medulloblastoma
Alkalmazások
3D sejtkultúra, Idegtudomány
Szinonimák
  • D283 Med
  • D283 MED
  • D283-MED
  • D283_Med
  • D-283 Med
  • D-283MED
  • D283MED
  • D283-Med
  • D-283
  • D283
  • Med 283
  • H283

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Adherens és szuszpenziós
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelialis
Daganatképző
Igen, meztelen egerekben
Kariotípus
A kariotípus 45, xY, -7, -8, -17, -20, der(20)t(1,20)(q12,q13), 8q+, 17p+ (tartomány = 41-46). Ez egy hipodiploid sejtvonal, a magasabb ploiditások gyakorisága 5,4%. Minden sejtben három marker kromoszóma van jelen. Ezek: der(20)t(1,20)(q12,q13), 8q+ és 17p+. Az N7, az N17 és az N20 egyetlen példányban van jelen. Az egyetlen x szerkezetileg normális, és az Y kromoszóma jelen van, amit fluoreszcens mikroszkópia is megerősít.

04Azonosítók

Hivatkozás
D283Med (Cytion katalógusszám 300330)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1155

05Kifejeződés és fogékonyság

Fehérjeexpresszió
Glutamin-szintetáz pozitív, neuronspecifikus enoláz pozitív, gliafibrilláris savas fehérjék negatív, S100 (S-100) fehérje negatív
Izoenzimek
AK-1, 1, ES-D, 1, G6PD, B, GLO-I, 2, Me-2, 0, PGM1, 1, PGM3, 1

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Átültetés
Gyűjtse össze a szuszpenziós sejteket egy 15 ml-es csőbe, és óvatosan öblítse le a megtapadt sejteket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel (3-5 ml PBS T25, 5-10 ml T75 sejttenyésztő lombik esetén). Adjunk hozzá Accutase-t (1-2ml T25-ös, 2,5ml T75-ös sejttenyésztő lombikban), a sejtlapot teljesen le kell fedni. Inkubáljuk 10 percig környezeti hőmérsékleten, majd centrifugáljuk össze a szuszpenzióban növekvő sejteket és a megtapadt sejteket. Óvatosan reszuszpendáljuk a sejteket, és adagoljuk új lombikokba, amelyek friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
6 év
Etnikai hovatartozás
Európai