Gå til innholdet
D283Med
Vev
Hjerne
Sykdom
Medulloblastom
Synonymer
D283 Med, D283 MED, D283-MED, D283_Med, D-283 Med, D-283MED, D283MED, D283-Med, D-283, D283, Med 283, H283

Dokumenter

D283Med

Cell line · Produktnummer 300330

The D283Med cell line is a human medulloblastoma cell line that was derived from the cerebellum of a 6-year-old male. Medulloblastoma is a type of primiti...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

D283Med-cellelinjen er en human medulloblastom-cellelinje som ble avledet fra lillehjernen til en 6 år gammel mann. Medulloblastom er en type primitiv nevroektodermal svulst som først og fremst rammer barn, og som er lokalisert i lillehjernen, den delen av hjernen som er ansvarlig for motorisk kontroll og koordinasjon. D283Med-celler er mye brukt i onkologisk forskning, særlig i studier som fokuserer på biologien og farmakologien til medulloblastomer.

Denne cellelinjen har et adherent vekstmønster og har blitt brukt i utstrakt grad til å utforske de molekylære signalveiene som er involvert i patogenesen ved medulloblastom, for eksempel Sonic Hedgehog (SHH)- og WNT-signalveiene, som er kjent for å spille en viktig rolle i utviklingen og progresjonen av disse svulstene. Forskere bruker D283Med-linjen til å vurdere terapeutisk effekt og resistens, studere genuttrykksprofiler og utforske nye terapeutiske mål. Cellenes robuste vekst og typiske genetiske egenskaper ved medulloblastom gjør dem til en verdifull modell for prekliniske studier som tar sikte på å forstå tumorbiologi og teste ut kreftmedisiner.

D283Med-celler brukes dessuten i genetiske studier for å forstå virkningen av mutasjoner og for å vurdere mekanismer for metastase og tilbakefall i medulloblastom. De er et viktig verktøy for å undersøke onkogene prosesser på cellenivå, og bidrar dermed vesentlig til utviklingen av målrettede behandlinger for denne aggressive hjernesvulsten hos barn.

Vev
Hjerne
Sykdom
Medulloblastom
Søknader
3D-cellekultur, Nevrovitenskap
Synonymer
  • D283 Med
  • D283 MED
  • D283-MED
  • D283_Med
  • D-283 Med
  • D-283MED
  • D283MED
  • D283-Med
  • D-283
  • D283
  • Med 283
  • H283

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Adhesjon og suspensjon
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial
Tumorinduserende
Ja, i nakne mus
Karyotype
Karyotypen er 45, xY, -7, -8, -17, -20, der(20)t(1,20)(q12,q13), 8q+, 17p+ (intervall = 41 til 46). Dette er en hypodiploid cellelinje med en frekvens av høyere ploidier på 5,4 %. Tre markørkromosomer er til stede i alle cellene. De er: der(20)t(1,20)(q12,q13), 8q+ og 17p+. N7, N17 og N20 har én enkelt kopi. Den ene x-en er strukturelt normal, og Y-kromosomet er til stede, noe som bekreftes ved fluorescensmikroskopi.

04Identifikatorer

Kildehenvisning
D283Med (Cytion-katalognummer 300330)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1155

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon
Glutaminsyntetase positiv, nevronspesifikk enolase positiv, gliale fibrillære sure proteiner negativ, S100 (S-100)-protein negativ
Isoenzymer
AK-1, 1, ES-D, 1, G6PD, B, GLO-I, 2, Me-2, 0, PGM1, 1, PGM3, 1

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS og 1 % NEAA
Subkultivering
Samle opp suspensjonsceller i et 15 ml rør og skyll de adherente cellene forsiktig med PBS uten kalsium og magnesium (3-5 ml PBS for T25, 5-10 ml for T75-celledyrkningsflasker). Tilsett Accutase (1-2 ml per T25, 2,5 ml per T75-cellekulturkolbe), cellearket må være helt dekket. Inkuber ved omgivelsestemperatur i 10 minutter, og sentrifuger deretter cellene som vokser i suspensjon og de adherente cellene sammen. Resuspender cellene forsiktig, og fordel dem i nye kolber som inneholder nytt medium.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
6 år
Etnisitet
Europeisk