Pāriet uz saturu
D283Med
Audums
Smadzenes
Slimība
Medulloblastoma
Sinonīmi
D283 Med, D283 MED, D283-MED, D283_Med, D-283 Med, D-283MED, D283MED, D283-Med, D-283, D283, Med 283, H283

Dokumenti

D283Med

Cell line · Preces numurs 300330

The D283Med cell line is a human medulloblastoma cell line that was derived from the cerebellum of a 6-year-old male. Medulloblastoma is a type of primiti...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

D283Med šūnu līnija ir cilvēka meduloblastomas šūnu līnija, kas iegūta no sešus gadus veca vīrieša smadzenītēm. Medulloblastoma ir primitīva neiroektodermālā audzēja veids, kas galvenokārt skar bērnus un atrodas smadzenītēs - smadzeņu daļā, kura atbild par kustību kontroli un koordināciju. D283Med šūnas tiek plaši izmantotas onkoloģiskajos pētījumos, jo īpaši pētījumos, kas vērsti uz medulloblastomas bioloģiju un farmakoloģiju.

Šai šūnu līnijai piemīt adherents augšanas modelis, un tā ir plaši izmantota, lai pētītu ar medulloblastomas patoģenēzi saistītos molekulāros ceļus, piemēram, Sonic Hedgehog (SHH) un WNT signalizācijas ceļus, kam ir būtiska nozīme šo audzēju attīstībā un progresēšanā. Pētnieki izmanto D283Med līniju, lai novērtētu terapeitisko efektivitāti un rezistenci, pētītu gēnu ekspresijas profilus un izpētītu jaunus terapeitiskos mērķus. Šīs līnijas spēcīgā augšana un tipiskās medulloblastomas ģenētiskās iezīmes padara to par vērtīgu modeli pirmsklīniskajiem pētījumiem, kuru mērķis ir izprast audzēja bioloģiju un pārbaudīt pretvēža zāles.

Turklāt D283Med šūnas tiek izmantotas ģenētiskos pētījumos, lai izprastu mutāciju ietekmi un novērtētu medulloblastomas metastāžu un recidīvu mehānismus. Tās ir būtisks instruments onkogēno procesu izpētei šūnu līmenī, tādējādi sniedzot būtisku ieguldījumu šī agresīvā bērnu smadzeņu audzēja mērķterapijas izstrādē.

Audums
Smadzenes
Slimība
Medulloblastoma
Pieteikumi
3D šūnu kultūras, neirozinātne
Sinonīmi
  • D283 Med
  • D283 MED
  • D283-MED
  • D283_Med
  • D-283 Med
  • D-283MED
  • D283MED
  • D283-Med
  • D-283
  • D283
  • Med 283
  • H283

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Adhēzija un suspensija
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm
Kariotips
Kariatotips ir 45, xY, -7, -8, -17, -20, der(20)t(1,20)(q12,q13), 8q+, 17p+ (diapazons = 41 līdz 46). Šī ir hipodiploīdu šūnu līnija ar augstāku ploidiju biežumu 5,4 %. Visās šūnās ir trīs marķieru hromosomas. Tās ir: der(20)t(1,20)(q12,q13), 8q+ un 17p+. N7, N17 un N20 ir vienas kopijas. Viena x ir strukturāli normāla, un Y hromosoma ir klāt, ko apstiprina fluorescences mikroskopija.

04Identifikatori

Atsauce
D283Med (Cytion kataloga numurs 300330)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1155

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
Glutamīnsintetāze pozitīva, neironiem specifiskā enolāze pozitīva, glijas fibrilāro skābo olbaltumvielu negatīva, S100 (S-100) proteīns negatīvs
Izoenzīmi
AK-1, 1, ES-D, 1, G6PD, B, GLO-I, 2, Me-2, 0, PGM1, 1, PGM3, 1

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Pārstādīšana
Savāc suspensijas šūnas 15 ml mēģenē un uzmanīgi izskalo pielipušās šūnas, izmantojot PBS bez kalcija un magnija (3-5 ml PBS T25, 5-10 ml T75 šūnu kultūras kolbām). Pievienojiet Accutase (1-2 ml T25, 2,5 ml T75 šūnu kultūru kolbām), šūnu sloksnei jābūt pilnībā pārklātai. Inkubēt 10 minūtes istabas temperatūrā, pēc tam centrifugēt suspensijā augošās šūnas un pielipušās šūnas kopā. Uzmanīgi resuspendēt šūnas un iepildīt jaunās kolbās, kurās ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
6 gadi
Etniskā piederība
Eiropas