Mine otse sisu juurde
D283Med
Kude
Aju
Haigus
Medulloblastoom
Sünonüümid
D283 Med, D283 MED, D283-MED, D283_Med, D-283 Med, D-283MED, D283MED, D283-Med, D-283, D283, Med 283, H283

Dokumendid

D283Med

Cell line · Toote number 300330

The D283Med cell line is a human medulloblastoma cell line that was derived from the cerebellum of a 6-year-old male. Medulloblastoma is a type of primiti...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

D283Med rakuliin on inimese medulloblastoomi rakuliin, mis on saadud 6-aastase mehe väikeajust. Medulloblastoom on primitiivse neuroektodermise kasvaja tüüp, mis esineb peamiselt lastel ja asub väikeajus, mis on aju osa, mis vastutab motoorse kontrolli ja koordinatsiooni eest. D283Med rakke kasutatakse laialdaselt onkoloogilistes uuringutes, eelkõige medulloblastoomide bioloogiat ja farmakoloogiat käsitlevates uuringutes.

Sellel rakuliinil on kleepuv kasvumuster ja seda on laialdaselt kasutatud medulloblastoomi patogeneesis osalevate molekulaarradade, näiteks Sonic Hedgehogi (SHH) ja WNT signaaliradade uurimiseks, millel on teadaolevalt oluline roll nende kasvajate arengus ja progresseerumises. Teadlased kasutavad D283Med liini terapeutilise efektiivsuse ja resistentsuse hindamiseks, geeniekspressiooniprofiilide uurimiseks ja uute terapeutiliste sihtmärkide uurimiseks. Selle liini jõuline kasv ja tüüpilised medulloblastoomi geneetilised omadused teevad sellest väärtusliku mudeli prekliinilisteks uuringuteks, mille eesmärk on mõista kasvaja bioloogiat ja katsetada vähivastaseid ravimeid.

Lisaks kasutatakse D283Med rakke geneetilistes uuringutes, et mõista mutatsioonide mõju ning hinnata medulloblastoomi metastaasi ja taastekke mehhanisme. Nad on oluline vahend onkogeensete protsesside uurimiseks rakutasandil, aidates seeläbi oluliselt kaasa selle agressiivse pediaatrilise ajukasvaja sihtotstarbeliste ravimeetodite väljatöötamisele.

Kude
Aju
Haigus
Medulloblastoom
Rakendused
3D rakukultuur, neuroteadus
Sünonüümid
  • D283 Med
  • D283 MED
  • D283-MED
  • D283_Med
  • D-283 Med
  • D-283MED
  • D283MED
  • D283-Med
  • D-283
  • D283
  • Med 283
  • H283

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Adhesiivne ja suspensioon
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel
Karyotüüp
Karyotüüp on 45, xY, -7, -8, -17, -20, der(20)t(1,20)(q12,q13), 8q+, 17p+ (vahemik = 41 kuni 46). Tegemist on hüpodiploidse rakuliiniga, mille kõrgema ploidsuse sagedus on 5,4%. Kõikides rakkudes on kolm markerkromosoomi. Need on: der(20)t(1,20)(q12,q13), 8q+ ja 17p+. N7, N17 ja N20 on ühekordsed koopiad. Üksik x on struktuuriliselt normaalne ja Y-kromosoom on olemas, mida kinnitab fluorestsentsmikroskoopia.

04Tunnused

Viide
D283Med (Cytioni katalooginumber 300330)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1155

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Glutamiini süntesaas positiivne, neuronspetsiifiline enolaas positiivne, gliaalfibrillaarsed happelised valgud negatiivsed, S100 (S-100) valk negatiivne
Isoensüümid
AK-1, 1, ES-D, 1, G6PD, B, GLO-I, 2, Me-2, 0, PGM1, 1, PGM3, 1

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Kultuuri edasikasvatamine
Koguda suspensioonirakud 15 ml tuubi ja loputada kleepunud rakud hoolikalt kaltsiumi- ja magneesiumivaba PBS-ga (3-5 ml PBS T25, 5-10 ml T75 rakukultuurikolbide puhul). Lisage Accutase (1-2 ml T25, 2,5 ml T75 rakukultuurikolbi kohta), rakukile peab olema täielikult kaetud. Inkubeerige 10 minutit ümbritseval temperatuuril, seejärel tsentrifuugige suspensioonis kasvavad rakud ja adherentsed rakud kokku. Resuspendeerige rakud ettevaatlikult ja doseerige uutesse kolvidesse, mis sisaldavad värsket söötmeainet.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
6 aastat
Etniline kuuluvus
Euroopa