Siirry sisältöön
D283Med
Kudos
Aivot
Sairaus
Medulloblastooma
Synonyymit
D283 Med, D283 MED, D283-MED, D283_Med, D-283 Med, D-283MED, D283MED, D283-Med, D-283, D283, Med 283, H283

Asiakirjat

D283Med

Cell line · Tuotenumero 300330

The D283Med cell line is a human medulloblastoma cell line that was derived from the cerebellum of a 6-year-old male. Medulloblastoma is a type of primiti...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

D283Med-solulinja on ihmisen medulloblastoomasolulinja, joka on peräisin 6-vuotiaan miehen pikkuaivoista. Medulloblastooma on primitiivisen neuroekodermikasvaimen tyyppi, joka vaikuttaa pääasiassa lapsiin ja sijaitsee pikkuaivoissa, jotka ovat motorisesta hallinnasta ja koordinaatiosta vastaava aivojen osa. D283Med-soluja käytetään laajalti onkologisessa tutkimuksessa, erityisesti medulloblastoomien biologiaan ja farmakologiaan keskittyvissä tutkimuksissa.

Tällä solulinjalla on tarttuva kasvutapa, ja sitä on käytetty laajasti medulloblastooman patogeneesiin liittyvien molekyylireittien, kuten Sonic Hedgehog (SHH) ja WNT-signalointireittien, tutkimiseen, sillä niillä tiedetään olevan merkittävä rooli näiden kasvainten kehittymisessä ja etenemisessä. Tutkijat käyttävät D283Med-linjaa terapeuttisen tehon ja resistenssin arviointiin, geeniekspressioprofiilien tutkimiseen ja uusien terapeuttisten kohteiden tutkimiseen. Linjan voimakas kasvu ja tyypilliset medulloblastooman geneettiset ominaisuudet tekevät siitä arvokkaan mallin prekliinisiin tutkimuksiin, joilla pyritään ymmärtämään kasvaimen biologiaa ja testaamaan syöpälääkkeitä.

Lisäksi D283Med-soluja hyödynnetään geneettisissä tutkimuksissa mutaatioiden vaikutuksen ymmärtämiseksi ja medulloblastooman etäpesäkkeiden ja uusiutumisen mekanismien arvioimiseksi. Ne tarjoavat ratkaisevan tärkeän välineen onkogeenisten prosessien tutkimiseen solutasolla ja edistävät siten merkittävästi kohdennettujen hoitojen kehittämistä tähän aggressiiviseen lasten aivokasvaimeen.

Kudos
Aivot
Sairaus
Medulloblastooma
Sovellukset
3D-soluviljely, Neurotiede
Synonyymit
  • D283 Med
  • D283 MED
  • D283-MED
  • D283_Med
  • D-283 Med
  • D-283MED
  • D283MED
  • D283-Med
  • D-283
  • D283
  • Med 283
  • H283

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Adheesio ja suspensio
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä
Karyotyyppi
Karyotyyppi on 45, xY, -7, -8, -17, -20, der(20)t(1,20)(q12,q13), 8q+, 17p+ (vaihteluväli = 41-46). Kyseessä on hypodiploidinen solulinja, jossa korkeampien ploidioiden esiintyvyys on 5,4 %. Kaikissa soluissa on kolme merkkikromosomia. Ne ovat: der(20)t(1,20)(q12,q13), 8q+ ja 17p+. N7, N17 ja N20 ovat yksittäiskopioita. Yksittäinen x on rakenteellisesti normaali, ja Y-kromosomi on läsnä, kuten fluoresenssimikroskopialla on vahvistettu.

04Tunnisteet

Lähdeviite
D283Med (Cytionin luettelonumero 300330)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1155

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
Glutamiinisyntetaasi positiivinen, neuronispesifinen enolaasi positiivinen, gliafibrillaariset happamat proteiinit negatiiviset, S100-proteiini (S-100) negatiivinen
Isoentsyymit
AK-1, 1, ES-D, 1, G6PD, B, GLO-I, 2, Me-2, 0, PGM1, 1, PGM3, 1

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Soluviljely
Kerää suspensiosolut 15 ml:n putkeen ja huuhtele tarttuneet solut huolellisesti PBS:llä, jossa ei ole kalsiumia ja magnesiumia (3-5 ml PBS:ää T25-soluviljelypulloissa, 5-10 ml T75-soluviljelypulloissa). Lisää Accutase (1-2 ml T25-soluviljelypulloa kohti, 2,5 ml T75-soluviljelypulloa kohti), solulevyn on peitettävä kokonaan. Inkuboidaan huoneenlämmössä 10 minuuttia, sitten sentrifugoidaan suspensiossa kasvavat solut ja adheesiosolut yhteen. Solut suspendoidaan varovasti uudelleen ja annostellaan uusiin pulloihin, jotka sisältävät tuoretta elatusainetta.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
6 vuotta
Etnisyys
Eurooppalainen