الانتقال إلى المحتوى
D283Med
الأنسجة
الدماغ
المرض
الورم الأرومي النخاعي
المرادفات
D283 Med, D283 MED, D283-MED, D283_Med, D-283 Med, D-283MED, D283MED, D283-Med, D-283, D283, Med 283, H283

المستندات

D283Med

Cell line · رقم المنتج 300330

The D283Med cell line is a human medulloblastoma cell line that was derived from the cerebellum of a 6-year-old male. Medulloblastoma is a type of primiti...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

سلالة الخلايا D283Med هي سلالة خلايا الورم الأرومي النخاعي البشري المشتقة من المخيخ لذكر يبلغ من العمر 6 سنوات. الورم الأرومي النخاعي الأرومي هو نوع من أورام الأديم العصبي البدائي الذي يصيب الأطفال في المقام الأول ويقع في المخيخ، وهو الجزء المسؤول عن التحكم الحركي والتنسيق. تُستخدم خلايا D283Med على نطاق واسع في أبحاث الأورام، لا سيما في الدراسات التي تركز على بيولوجيا الأورام الأرومية النخاعية ودراستها.

يُظهر هذا الخط الخلوي نمط نمو ملتصق، وقد استُخدم على نطاق واسع لاستكشاف المسارات الجزيئية المشاركة في التسبب في الإصابة بالأورام الأرومية النخاعية، مثل مسارات إشارات سونيك هيدجوغ (SHH) وWNT، والتي من المعروف أنها تلعب أدواراً مهمة في تطور هذه الأورام وتطورها. ويستخدم الباحثون خط D283Med لتقييم الفعالية العلاجية والمقاومة، ودراسة ملامح التعبير الجيني، واستكشاف أهداف علاجية جديدة. إن النمو القوي لهذا الخط والسمات الوراثية النموذجية للورم الأرومي النخاعي يجعله نموذجاً قيماً للدراسات ما قبل السريرية التي تهدف إلى فهم بيولوجيا الورم واختبار الأدوية المضادة للسرطان.

وعلاوة على ذلك، تُستخدم خلايا D283Med في الدراسات الجينية لفهم تأثير الطفرات وتقييم آليات انتشار الورم الأرومي النخاعي وتكرار الإصابة به. وتوفر هذه الخلايا أداة حاسمة للتحقيق في العمليات المسببة للأورام على المستوى الخلوي، مما يساهم بشكل كبير في تطوير علاجات مستهدفة لهذا الورم الدماغي العدواني لدى الأطفال.

الأنسجة
الدماغ
المرض
الورم الأرومي النخاعي
التطبيقات
زراعة الخلايا ثلاثية الأبعاد، علم الأعصاب
المرادفات
  • D283 Med
  • D283 MED
  • D283-MED
  • D283_Med
  • D-283 Med
  • D-283MED
  • D283MED
  • D283-Med
  • D-283
  • D283
  • Med 283
  • H283

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
التثبيت والتعليق
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران العارية
النمط الكروموسومي
النمط النووي هو 45، xY، -7، -7، -8، -17، -20، der(20)t(1،20)(q12،q13)، 8q+، 17p+ (النطاق = 41 إلى 46). هذا هو خط خلوي ناقص الصبغيات الصبغية مع تواتر من الصبغيات الصبغية العليا بنسبة 5.4%. وتوجد ثلاثة كروموسومات مؤشرة في جميع الخلايا. وهي: der(20) t(1,20)(q12,q13) و8q+ و17p+. تحتوي N7 و N17 و N20 على نسخ مفردة. كروموسوم x المفرد طبيعي من الناحية التركيبية، وكروموسوم Y موجود كما تم تأكيده بالفحص المجهري الفلوري.

04المعرّفات

المرجع
D283Med (كتالوج سيتيون رقم 300330)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1155

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير البروتيني
غلوتامين سينثيتاز الغلوتامين إيجابي، إنولاز عصبي محدد إيجابي، بروتينات حمضية ليفية دبقية سلبية، بروتين S100 (S-100) سلبي
الإيزوزيمات
مد-1، 1، 1، خ ع-1، 1، خ ع-6، خ ع-6، خ ع-6، خ ع-6، خ ع-3، خ ع-3، خ ع-2، خ ع-1، خ ع-1، خ ع-1، خ ع-3، خ ع-3، خ ع-1

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
إعادة الاستنبات
اجمع الخلايا المعلقة في أنبوب سعة 15 مل واشطف الخلايا الملتصقة بعناية باستخدام PBS بدون كالسيوم ومغنيسيوم (3-5 مل من PBS لـ T25، 5-10 مل لقوارير زراعة الخلايا T75). إضافة أكوتاز (1-2 مل لكل T25، 2.5 مل لكل قارورة زراعة خلايا T75)، يجب تغطية صفيحة الخلية بالكامل. احتضنها في درجة حرارة محيطة لمدة 10 دقائق، ثم قم بالطرد المركزي للخلايا التي تنمو في المعلق والخلايا الملتصقة معًا. يُعاد خلط الخلايا بعناية وتُوزع في قوارير جديدة تحتوي على وسط جديد.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
6 سنوات
الأصل العرقي
أوروبي