Huh-7.5.1

La lignée cellulaire Huh-7.5.1 est un sous-clone dérivé des cellules d’hépatome Huh-7, connu pour sa permissivité accrue à la réplication du virus de l’hépatite C (VHC). Développées comme une version améliorée de la lignée cellulaire Huh-7.5, les cellules Huh-7.5.1 ont été établies à partir d’une lignée cellulaire réplicon du VHC guérie et présentent une plus grande sensibilité à l’infection par le VHC que leurs prédécesseurs. Elles sont capables de soutenir des cycles de réplication vigoureux du VHC, ce qui en fait un modèle privilégié pour l’étude des cycles de vie du VHC, notamment l’entrée du virus, la réplication de l’ARN et la production de particules infectieuses.

L’utilisation des cellules Huh-7.5.1 s’est avérée particulièrement utile dans la recherche sur le VHC en raison de leur efficacité accrue dans la réplication de l’ARN viral et la production de virus infectieux. Cette lignée cellulaire présente des titres viraux élevés, atteignant généralement de 10⁴ à 10⁵ unités infectieuses par millilitre dans les surnageants de culture lors d’infections par la souche HCV-JFH1. Cette caractéristique permet une analyse détaillée de la pathogenèse virale et des réponses antivirales in vitro. Il est important de noter que les cellules Huh-7.5.1 sont utilisées pour le criblage de composés antiviraux ciblant le VHC, ce qui facilite le développement de traitements contre le VHC et apporte des éclaircissements sur les mécanismes de résistance.

De plus, ces cellules ont été utilisées dans des études plus larges portant sur les interactions virales avec les mécanismes des cellules hôtes, le métabolisme lipidique et les cibles thérapeutiques connexes. Par exemple, l’inhibition de voies cellulaires telles que la voie SREBP médiée par la protéase SKI-1/S1P a démontré des effets sur la réplication virale au sein des cellules Huh-7.5.1, soulignant ainsi leur utilité pour la recherche sur les stratégies antivirales dirigées contre l’hôte.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.