Μετάβαση στο περιεχόμενο
Huh-7.5.1
Ιστός
Ήπαρ
Ασθένεια
Ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα ενηλίκων
Συνώνυμα
Huh 7.5.1, Huh7.5.1

Έγγραφα

Huh-7.5.1

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305491

Η κυτταρική σειρά Huh-7.5.1 είναι ένας υποκλώνος που προέρχεται από τα κύτταρα ηπατώματος Huh-7, γνωστή για την αυξημένη ευαισθησία της στην αναπαραγωγή του ιού της ηπατίτιδας C (HCV)....

€550.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά Huh-7.5.1 είναι ένας υποκλώνος που προέρχεται από τα κύτταρα ηπατώματος Huh-7, γνωστός για την αυξημένη ευαισθησία του στην αναπαραγωγή του ιού της ηπατίτιδας C (HCV). Τα κύτταρα Huh-7.5.1, τα οποία αναπτύχθηκαν ως βελτιωμένη έκδοση της κυτταρικής σειράς Huh-7.5, δημιουργήθηκαν από μια θεραπευμένη κυτταρική σειρά ρεπλικονίου του HCV και παρουσιάζουν μεγαλύτερη ευαισθησία στη μόλυνση από τον HCV σε σύγκριση με τους προκατόχους τους. Είναι ικανά να υποστηρίζουν ισχυρούς κύκλους αναπαραγωγής του HCV, γεγονός που τα καθιστά ένα προτιμώμενο μοντέλο για τη μελέτη των κύκλων ζωής του HCV, συμπεριλαμβανομένης της εισόδου του ιού, της αναπαραγωγής του RNA και της παραγωγής μολυσματικών σωματιδίων.

Η χρήση των κυττάρων Huh-7.5.1 έχει αποδειχθεί ιδιαίτερα πολύτιμη στην έρευνα για τον HCV, λόγω της αυξημένης αποτελεσματικότητάς τους στην αναπαραγωγή του ιικού RNA και στην παραγωγή μολυσματικών ιών. Αυτή η κυτταρική σειρά παρουσιάζει υψηλούς ιικούς τίτλους, που συνήθως φτάνουν τις 10⁴ έως 10⁵ μολυσματικές μονάδες ανά χιλιοστόλιτρο στα υπερκείμενα καλλιεργειών κατά τη διάρκεια μολύνσεων με το στέλεχος HCV-JFH1. Αυτό το χαρακτηριστικό επιτρέπει τη λεπτομερή ανάλυση της ιικής παθογένεσης και των αντιιικών αποκρίσεων in vitro. Είναι σημαντικό να σημειωθεί ότι τα κύτταρα Huh-7.5.1 χρησιμοποιούνται στον έλεγχο αντιιικών ενώσεων που στοχεύουν τον HCV, συμβάλλοντας στην ανάπτυξη θεραπειών κατά του HCV και παρέχοντας πληροφορίες σχετικά με τους μηχανισμούς αντοχής.

Επιπλέον, τα κύτταρα έχουν χρησιμοποιηθεί σε ευρύτερες μελέτες που αφορούν τις αλληλεπιδράσεις του ιού με τους μηχανισμούς του κυττάρου-ξενιστή, το μεταβολισμό των λιπιδίων και σχετικούς θεραπευτικούς στόχους. Για παράδειγμα, η αναστολή κυτταρικών οδών, όπως η οδός SREBP που μεσολαβείται από την πρωτεάση SKI-1/S1P, έχει αποδείξει ότι επηρεάζει την αναπαραγωγή του ιού εντός των κυττάρων Huh-7.5.1, υπογραμμίζοντας τη χρησιμότητά τους για την έρευνα σχετικά με αντιιικές στρατηγικές που στοχεύουν στον ξενιστή.

Ιστός
Ήπαρ
Ασθένεια
Ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα ενηλίκων
Συνώνυμα
  • Huh 7.5.1
  • Huh7.5.1

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Αναγνωριστικά

Παραπομπή
Huh-7.5.1 (αριθμός καταλόγου Cytion 305491)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_E049

04Έκφραση και ευαισθησία

Προφίλ μεταλλάξεων
Μετάλλαξη: KDR, p.Gln472His (c.1416A>T), ομόζυγη· Μετάλλαξη: POLD3, p.Lys109Arg (c.326A>G) (p.Lys70Arg, c.209A>G); Μετάλλαξη: RIGI, p.Thr55Ile (c.164C>T); Μετάλλαξη: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T); Μετάλλαξη: TP53, p.Tyr220Cys (c.659A>G), ομόζυγη
Ευαισθησία στον ιό
Σε σύγκριση με τη μητρική κυτταρική σειρά Huh-7, επιτρέπει την αυξημένη παραγωγή του ιού της ηπατίτιδας C (HCV) όταν μολυνθεί με το στέλεχος JFH-1.

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Πυκνότητα σποράς
2-4*10⁴/cm²
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Ηλικία δωρητή
57 χρόνια
Εθνικότητα
Ιαπωνικά