Huh-7.5.1

La linea cellulare Huh-7.5.1 è un sottoclone derivato dalle cellule di epatoma Huh-7, nota per la sua maggiore permissività alla replicazione del virus dell’epatite C (HCV). Sviluppate come versione migliorata della linea cellulare Huh-7.5, le cellule Huh-7.5.1 sono state ottenute da una linea cellulare replicante dell’HCV guarita e mostrano una maggiore suscettibilità all’infezione da HCV rispetto alle loro predecessori. Sono in grado di supportare robusti cicli di replicazione dell’HCV, il che le rende un modello privilegiato per lo studio dei cicli di vita dell’HCV, tra cui l’ingresso virale, la replicazione dell’RNA e la produzione di particelle infettive.

L’uso delle cellule Huh-7.5.1 si è rivelato particolarmente prezioso nella ricerca sull’HCV grazie alla loro maggiore efficienza nella replicazione dell’RNA virale e nella produzione di virus infettivi. Questa linea cellulare presenta titoli virali elevati, che in genere raggiungono da 10⁴ a 10⁵ unità infettive per millilitro nei supernatanti di coltura durante le infezioni da ceppo HCV-JFH1. Questa caratteristica consente un’analisi dettagliata della patogenesi virale e delle risposte antivirali in vitro. È importante sottolineare che le cellule Huh-7.5.1 vengono impiegate nello screening di composti antivirali mirati all’HCV, favorendo lo sviluppo di trattamenti contro l’HCV e fornendo approfondimenti sui meccanismi di resistenza.

Inoltre, le cellule sono state utilizzate in studi più ampi riguardanti le interazioni virali con i meccanismi delle cellule ospiti, il metabolismo dei lipidi e i relativi bersagli terapeutici. Ad esempio, l’inibizione di vie cellulari quali la via SREBP mediata dalla proteasi SKI-1/S1P ha dimostrato di influire sulla replicazione virale all’interno delle cellule Huh-7.5.1, evidenziandone l’utilità per la ricerca sulle strategie antivirali dirette all’ospite.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia