Huh-7.5.1

Buněčná linie Huh-7.5.1 je subklon odvozený z buněk hepatomu Huh-7, který je známý svou zvýšenou náchylností k replikaci viru hepatitidy C (HCV). Buňky Huh-7.5.1, vyvinuté jako vylepšená verze buněčné linie Huh-7.5, byly izolovány z vyléčené replikonové buněčné linie HCV a vykazují ve srovnání se svými předchůdkyněmi vyšší náchylnost k infekci HCV. Jsou schopny podporovat silné replikační cykly HCV, což z nich činí preferovaný model pro studium životních cyklů HCV, včetně vstupu viru do buňky, replikace RNA a produkce infekčních částic.

Použití buněk Huh-7.5.1 se v výzkumu HCV osvědčilo zejména díky jejich zvýšené účinnosti při replikaci virové RNA a produkci infekčních virů. Tato buněčná linie vykazuje vysoké virové titry, které při infekci kmenem HCV-JFH1 obvykle dosahují 10⁴ až 10⁵ infekčních jednotek na mililitr v kultivačních supernatantech. Tato vlastnost umožňuje podrobnou analýzu virové patogeneze a antivirových reakcí in vitro. Důležité je, že buňky Huh-7.5.1 se používají při screeningu antivirových sloučenin zaměřených na HCV, čímž napomáhají vývoji léčby proti HCV a poskytují poznatky o mechanismech rezistence.

Kromě toho byly tyto buňky použity v širších studiích zabývajících se interakcemi viru s mechanismy hostitelské buňky, metabolismem lipidů a souvisejícími terapeutickými cíli. Například inhibice buněčných drah, jako je SREBP dráha zprostředkovaná proteázou SKI-1/S1P, prokázala vliv na replikaci viru v buňkách Huh-7.5.1, což zdůrazňuje jejich užitečnost pro výzkum antivirových strategií zaměřených na hostitele.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení