Huh-7.5.1

Huh-7.5.1-solulinja on Huh-7-hepatomasoluista johdettu aliklooni, joka tunnetaan erityisen hyvästä alttiudestaan C-hepatiittiviruksen (HCV) replikaatiolle. Huh-7.5.1-solut kehitettiin paranneltuna versiona Huh-7.5-solulinjasta, ja ne perustettiin parantuneesta HCV-replikonisolulinjasta. Ne ovat alttiimpia HCV-infektiolle kuin edeltäjänsä. Ne pystyvät tukemaan voimakkaita HCV-replikaatiosyklejä, mikä tekee niistä suositun mallin HCV:n elinkaaren tutkimiseen, mukaan lukien viruksen tunkeutuminen soluun, RNA:n replikaatio ja tarttuvien partikkelien tuotanto.

Huh-7.5.1-solujen käyttö on ollut erityisen arvokasta HCV-tutkimuksessa, koska ne tehostavat viruksen RNA:n replikaatiota ja tarttuvien virusten tuotantoa. Tällä solulinjalla on korkeat virustitterit, jotka saavuttavat tyypillisesti 10⁴–10⁵ tarttuvaa yksikköä millilitrassa viljelyn supernatantissa HCV-JFH1-kannan infektioiden aikana. Tämä ominaisuus mahdollistaa viruksen patogeneesin ja antiviraalisten vasteiden yksityiskohtaisen analysoinnin in vitro. Merkittävää on, että Huh-7.5.1-soluja käytetään HCV:tä vastaan kohdistuvien antiviraalisten yhdisteiden seulonnassa, mikä auttaa HCV:n hoitojen kehittämisessä ja tarjoaa tietoa resistenssimekanismeista.

Lisäksi soluja on käytetty laajemmissa tutkimuksissa, jotka käsittelevät viruksen vuorovaikutusta isäntäsolun mekanismien kanssa, lipidien aineenvaihduntaa ja niihin liittyviä terapeuttisia kohteita. Esimerkiksi solureittien, kuten SKI-1/S1P-proteaasin välittämän SREBP-reitin, estäminen on osoittanut vaikuttavan viruksen replikaatioon Huh-7.5.1-soluissa, mikä korostaa niiden hyödyllisyyttä isäntäsoluihin kohdistuvien antiviraalisten strategioiden tutkimuksessa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa