Gå direkte til indholdet
Huh-7.5.1
Væv
Lever
Sygdom
Hepatocellulært karcinom hos voksne
Synonymer
Huh 7.5.1, Huh7.5.1

Dokumenter

Huh-7.5.1

Cell line · Varenummer 305491

Huh-7.5.1-cellelinjen er en subklon, der stammer fra Huh-7-hepatomcellerne, og som er kendt for sin øgede modtagelighed for replikation af hepatitis C-virus (HCV)....

€550.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Huh-7.5.1-cellelinjen er en subklon, der stammer fra Huh-7-hepatomcellerne, og som er kendt for sin øgede modtagelighed for replikation af hepatitis C-virus (HCV). Huh-7.5.1-cellerne, der er udviklet som en forbedret version af Huh-7.5-cellelinjen, blev etableret ud fra en helbredt HCV-replikon-cellelinje og udviser større modtagelighed for HCV-infektion sammenlignet med deres forgængere. De er i stand til at understøtte robuste HCV-replikationscyklusser, hvilket gør dem til en foretrukken model til undersøgelse af HCV-livscyklusser, herunder virusindtrængning, RNA-replikation og produktion af infektiøse partikler.

Anvendelsen af Huh-7.5.1-celler har været særligt værdifuld i HCV-forskningen på grund af deres øgede effektivitet i replikation af viralt RNA og produktion af infektiøse vira. Denne cellelinje udviser høje virale titere, der typisk når op på 10⁴ til 10⁵ infektiøse enheder pr. milliliter i kultursupernatanter under infektioner med HCV-JFH1-stammen. Denne egenskab muliggør en detaljeret analyse af viral patogenese og antivirale responser in vitro. Det er vigtigt at bemærke, at Huh-7.5.1-celler anvendes til screening for antivirale forbindelser, der er rettet mod HCV, hvilket bidrager til udviklingen af behandlinger mod HCV og giver indsigt i resistensmekanismer.

Derudover er cellerne blevet anvendt i bredere undersøgelser, der omfatter virale interaktioner med værtscellens mekanismer, lipidmetabolisme og relaterede terapeutiske mål. For eksempel har hæmning af cellulære signalveje, såsom den SKI-1/S1P-protease-medierede SREBP-signalvej, vist sig at have indvirkning på virusreplikationen i Huh-7.5.1-celler, hvilket understreger deres anvendelighed i forskning i værtsrettede antivirale strategier.

Væv
Lever
Sygdom
Hepatocellulært karcinom hos voksne
Synonymer
  • Huh 7.5.1
  • Huh7.5.1

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Identifikatorer

Kildehenvisning
Huh-7.5.1 (Cytion-katalognummer 305491)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_E049

04Udtryk og modtagelighed

Mutationsprofil
Mutation: KDR, p.Gln472His (c.1416A>T), homozygot; Mutation: POLD3, p.Lys109Arg (c.326A>G) (p.Lys70Arg, c.209A>G); Mutation: RIGI, p.Thr55Ile (c.164C>T); Mutation: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T); Mutation: TP53, p.Tyr220Cys (c.659A>G), homozygot
Virusfølsomhed
Sammenlignet med den oprindelige Huh-7-cellelinje muliggør den en øget produktion af hepatitis C-virus (HCV) ved infektion med stammen JFH-1.

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Såtæthed
2–4 × 10⁴/cm²
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
57 år
Etnisk tilhørsforhold
Japansk