Huh-7.5.1

A linha celular Huh-7.5.1 é um subclone derivado das células de hepatoma Huh-7, conhecida pela sua maior permissividade à replicação do vírus da hepatite C (VHC). Desenvolvidas como uma versão melhorada da linha celular Huh-7.5, as células Huh-7.5.1 foram estabelecidas a partir de uma linha celular de replicão do VHC curada e apresentam maior suscetibilidade à infeção pelo VHC em comparação com as suas antecessoras. São capazes de suportar ciclos robustos de replicação do VHC, o que as torna um modelo preferido para o estudo dos ciclos de vida do VHC, incluindo a entrada viral, a replicação do ARN e a produção de partículas infecciosas.

A utilização das células Huh-7.5.1 tem-se revelado particularmente valiosa na investigação do VHC devido à sua maior eficiência na replicação do ARN viral e na produção de vírus infecciosos. Esta linha celular apresenta títulos virais elevados, atingindo normalmente 10⁴ a 10⁵ unidades infecciosas por mililitro nos sobrenadantes de cultura durante infeções pela estirpe HCV-JFH1. Esta característica permite uma análise detalhada da patogénese viral e das respostas antivirais in vitro. É importante referir que as células Huh-7.5.1 são utilizadas na triagem de compostos antivirais que têm como alvo o VHC, auxiliando o desenvolvimento de tratamentos contra o VHC e proporcionando insights sobre os mecanismos de resistência.

Além disso, as células têm sido utilizadas em estudos mais abrangentes que envolvem interações virais com a maquinaria celular do hospedeiro, o metabolismo lipídico e alvos terapêuticos relacionados. Por exemplo, a inibição de vias celulares, como a via SREBP mediada pela protease SKI-1/S1P, demonstrou ter impacto na replicação do vírus nas células Huh-7.5.1, destacando a sua utilidade na investigação de estratégias antivirais direcionadas para o hospedeiro.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia