Премини към съдържанието
Huh-7.5.1
Тъкан
Черен дроб
Заболяване
Хепатоцелуларен карцином при възрастни
Синоними
Huh 7.5.1, Huh7.5.1

Документи

Huh-7.5.1

Cell line · Номер на продукта 305491

Клетъчната линия Huh-7.5.1 е субклон, получен от хепатомните клетки Huh-7, известен със своята повишена податливост към репликацията на вируса на хепатит С (HCV)....

€550.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия Huh-7.5.1 е субклон, получен от хепатомните клетки Huh-7, известен със своята повишена податливост към репликацията на вируса на хепатит С (HCV). Разработени като подобрена версия на клетъчната линия Huh-7.5, клетките Huh-7.5.1 са създадени от излекувана клетъчна линия с HCV-репликон и проявяват по-висока податливост към инфекция с HCV в сравнение с предшествениците си. Те са способни да поддържат стабилни цикли на репликация на HCV, което ги превръща в предпочитан модел за изучаване на жизнените цикли на HCV, включително проникването на вируса, репликацията на РНК и производството на инфекциозни частици.

Използването на клетки Huh-7.5.1 е особено ценно в изследванията на HCV поради тяхната повишена ефективност при репликацията на вирусната РНК и производството на инфекциозни вируси. Тази клетъчна линия показва високи вирусни титри, които обикновено достигат от 10⁴ до 10⁵ инфекциозни единици на милилитър в супернатантите от културите по време на инфекции с щам HCV-JFH1. Тази характеристика позволява подробен анализ на вирусната патогенеза и антивирусните реакции in vitro. Важно е да се отбележи, че клетките Huh-7.5.1 се използват при скрининга на антивирусни съединения, насочени срещу HCV, като подпомагат разработването на лечения срещу HCV и предоставят информация за механизмите на резистентност.

Освен това клетките са били използвани в по-широкообхватни проучвания, свързани с вирусни взаимодействия с механизмите на клетката-гостоприемник, липидния метаболизъм и свързаните с тях терапевтични мишени. Например, инхибирането на клетъчни пътища като SREBP-пътя, медииран от протеазата SKI-1/S1P, е показало въздействие върху репликацията на вируса в клетките Huh-7.5.1, което подчертава тяхната полезност за изследвания в областта на антивирусните стратегии, насочени към гостоприемника.

Тъкан
Черен дроб
Заболяване
Хепатоцелуларен карцином при възрастни
Синоними
  • Huh 7.5.1
  • Huh7.5.1

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Идентификатори

Източник
Huh-7.5.1 (каталожен номер на Cytion 305491)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_E049

04Проява и предразположеност

Мутационен профил
Мутация: KDR, p.Gln472His (c.1416A>T), хомозиготна; Мутация: POLD3, p.Lys109Arg (c.326A>G) (p.Lys70Arg, c.209A>G); Мутация: RIGI, p.Thr55Ile (c.164C>T); Мутация: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T); Мутация: TP53, p.Tyr220Cys (c.659A>G), хомозиготна
Податливост към вируси
В сравнение с родителската клетъчна линия Huh-7, тя позволява по-голямо производство на вируса на хепатит С (HCV) при инфектиране с щам JFH-1.

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Плътност на засяването
2–4 × 10⁴/см²
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Възраст на донора
57 години
Етническа принадлежност
Японски