Tartalomra ugrás
Huh-7.5.1
Szövet
Máj
Betegség
Felnőttkori hepatocelluláris karcinóma
Szinonimák
Huh 7.5.1, Huh7.5.1

Dokumentumok

Huh-7.5.1

Cell line · Termékszám 305491

A Huh-7.5.1 sejtvonal a Huh-7 hepatoma sejtekből származó szubklón, amelyről ismert, hogy fokozottan alkalmas a hepatitis C vírus (HCV) replikációjára....

€550.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A Huh-7.5.1 sejtvonal a Huh-7 hepatoma sejtekből származó szubklón, amely a hepatitis C vírus (HCV) replikációjára irányuló fokozott fogékonyságáról ismert. A Huh-7.5 sejtvonal továbbfejlesztett változataként kifejlesztett Huh-7.5.1 sejtek egy gyógyított HCV-replikon sejtvonalból lettek létrehozva, és elődeikhez képest nagyobb fogékonyságot mutatnak a HCV-fertőzésre. Képesek erőteljes HCV-replikációs ciklusok fenntartására, ami miatt kedvelt modellként szolgálnak a HCV életciklusának tanulmányozásához, beleértve a vírus bejutását, az RNS-replikációt és a fertőző részecskék termelését.

A Huh-7.5.1 sejtek használata különösen értékesnek bizonyult a HCV-kutatásban, mivel fokozott hatékonysággal támogatják a vírus-RNS replikációját és a fertőző vírusok termelését. Ez a sejtvonal magas vírustiterrel rendelkezik, amely HCV-JFH1 törzsű fertőzések során a tenyészet felülúszóiban jellemzően eléri a 10⁴–10⁵ fertőző egységet milliliterenként. Ez a tulajdonság lehetővé teszi a vírusos patogenezis és az antivirális válaszok részletes in vitro elemzését. Fontos kiemelni, hogy a Huh-7.5.1 sejteket a HCV-t célzó antivirális vegyületek szűrésére is alkalmazzák, ami elősegíti a HCV elleni kezelések fejlesztését, és betekintést nyújt a rezisztenciamechanizmusokba.

Ezen felül a sejteket szélesebb körű vizsgálatokban is alkalmazták, amelyek a vírus és a gazdasejt-mechanizmusok közötti kölcsönhatásokat, a lipidanyagcserét, valamint a kapcsolódó terápiás célpontokat vizsgálták. Például olyan sejtes útvonalak gátlása, mint az SKI-1/S1P proteáz által közvetített SREBP-útvonal, kimutatható hatást gyakorolt a vírus replikációjára a Huh-7.5.1 sejtekben, ami kiemeli hasznosságukat a gazdaszervezetre irányuló antivirális stratégiák kutatásában.

Szövet
Máj
Betegség
Felnőttkori hepatocelluláris karcinóma
Szinonimák
  • Huh 7.5.1
  • Huh7.5.1

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Azonosítók

Hivatkozás
Huh-7.5.1 (Cytion katalógusszám: 305491)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_E049

04Kifejeződés és fogékonyság

Mutációs profil
Mutáció: KDR, p.Gln472His (c.1416A>T), homozigóta; Mutáció: POLD3, p.Lys109Arg (c.326A>G) (p.Lys70Arg, c.209A>G); Mutáció: RIGI, p.Thr55Ile (c.164C>T); Mutáció: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T); Mutáció: TP53, p.Tyr220Cys (c.659A>G), homozigóta
Vírusérzékenység
Az eredeti Huh-7 sejtvonalhoz képest a JFH-1 törzzsel való fertőzés esetén fokozottabb hepatitis C-vírus (HCV) termelést tesz lehetővé.

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Ültetési sűrűség
2–4 × 10⁴/cm²
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
57 év
Etnikai hovatartozás
Japán