Huh-7.5.1

Die Zelllinie Huh-7.5.1 ist ein aus den Huh-7-Hepatomzellen abgeleiteter Subklon, der für seine erhöhte Empfänglichkeit gegenüber der Replikation des Hepatitis-C-Virus (HCV) bekannt ist. Die Huh-7.5.1-Zellen wurden als verbesserte Version der Huh-7.5-Zelllinie entwickelt und aus einer geheilten HCV-Replikon-Zelllinie etabliert; sie weisen im Vergleich zu ihren Vorgängern eine höhere Anfälligkeit für eine HCV-Infektion auf. Sie sind in der Lage, robuste HCV-Replikationszyklen zu unterstützen, was sie zu einem bevorzugten Modell für die Untersuchung des HCV-Lebenszyklus macht, einschließlich des viralen Eintritts, der RNA-Replikation und der Produktion infektiöser Partikel.

Der Einsatz von Huh-7.5.1-Zellen hat sich in der HCV-Forschung aufgrund ihrer erhöhten Effizienz bei der viralen RNA-Replikation und der Produktion infektiöser Viren als besonders wertvoll erwiesen. Diese Zelllinie weist hohe Virustiter auf, die bei Infektionen mit dem HCV-JFH1-Stamm in Kulturüberständen typischerweise 10⁴ bis 10⁵ infektiöse Einheiten pro Milliliter erreichen. Diese Eigenschaft ermöglicht eine detaillierte Analyse der viralen Pathogenese und der antiviralen Reaktionen in vitro. Wichtig ist, dass Huh-7.5.1-Zellen beim Screening nach antiviralen Wirkstoffen gegen HCV eingesetzt werden, was die Entwicklung von Therapien gegen HCV unterstützt und Einblicke in Resistenzmechanismen liefert.

Darüber hinaus wurden die Zellen in umfassenderen Studien zu viralen Wechselwirkungen mit dem Wirtszellapparat, dem Lipidstoffwechsel und damit verbundenen therapeutischen Zielstrukturen eingesetzt. So hat beispielsweise die Hemmung zellulärer Signalwege wie des durch die SKI-1/S1P-Protease vermittelten SREBP-Signalwegs Auswirkungen auf die Virusreplikation in Huh-7.5.1-Zellen gezeigt, was deren Nutzen für die Erforschung wirtsgerichteter antiviraler Strategien unterstreicht.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung