Huh-7.5.1

Huh-7.5.1 rakuliin on Huh-7 hepatoma rakkudest saadud subkloon, mis on tuntud oma suurema vastuvõtlikkuse poolest C-hepatiidi viiruse (HCV) replikatsioonile. Huh-7.5.1 rakud, mis on välja töötatud Huh-7.5 rakuliini täiustatud versioonina, loodi ravitud HCV-replikoni rakuliinist ning need on oma eelkäijatega võrreldes vastuvõtlikumad HCV-nakkusele. Need suudavad toetada tugevaid HCV replikatsioonitsükleid, mis teeb neist eelistatud mudeli HCV elutsüklite uurimiseks, sealhulgas viiruse sisenemist, RNA replikatsiooni ja nakkavate osakeste tootmist.

Huh-7.5.1-rakkude kasutamine on olnud HCV-uuringutes eriti väärtuslik tänu nende suuremale efektiivsusele viiruse RNA replikatsioonis ja nakkavate viiruste tootmises. Kõnealune rakuliin näitab kõrgeid viirusetitreid, mis HCV-JFH1 tüve nakatumise korral ulatuvad kultuuri supernatandis tavaliselt 10⁴ kuni 10⁵ nakkavat ühikut milliliitri kohta. See omadus võimaldab viiruse patogeneesi ja antiviiruslike reaktsioonide üksikasjalikku analüüsi in vitro. Oluline on, et Huh-7.5.1 rakke kasutatakse HCV-le suunatud viirusevastaste ühendite sõelumisel, aidates kaasa HCV-vastaste ravimeetodite väljatöötamisele ja andes ülevaate resistentsusmehhanismidest.

Lisaks on neid rakke kasutatud laiemates uuringutes, mis käsitlevad viiruse interaktsioone peremeesraku süsteemiga, lipiidide ainevahetust ja nendega seotud terapeutilisi sihtmärke. Näiteks on selliste rakuliste signaaliteede nagu SKI-1/S1P proteaasi vahendatud SREBP-signaalitee pärssimine näidanud mõju viiruse replikatsioonile Huh-7.5.1-rakkudes, rõhutades nende kasulikkust peremeesrakule suunatud viirusevastaste strateegiate uurimisel.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest