Gå til innholdet
Huh-7.5.1
Vev
Lever
Sykdom
Hepatocellulært karsinom hos voksne
Synonymer
Huh 7.5.1, Huh7.5.1

Dokumenter

Huh-7.5.1

Cell line · Produktnummer 305491

Cellelinjen Huh-7.5.1 er en subklon avledet fra Huh-7-hepatomcellene, kjent for sin økte mottakelighet for replikasjon av hepatitt C-virus (HCV)....

€550.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

Huh-7.5.1-cellelinjen er en subklon avledet fra Huh-7-hepatomcellene, kjent for sin økte mottakelighet for replikasjon av hepatitt C-virus (HCV). Huh-7.5.1-cellene ble utviklet som en forbedret versjon av Huh-7.5-cellelinjen og ble etablert fra en kurert HCV-replikon-cellelinje. De viser høyere mottakelighet for HCV-infeksjon sammenlignet med sine forgjengere. De er i stand til å støtte robuste HCV-replikasjonssykluser, noe som gjør dem til en foretrukket modell for å studere HCV-livssykluser, inkludert viral inntrengning, RNA-replikasjon og produksjon av smittsomme partikler.

Bruken av Huh-7.5.1-celler har vært særlig verdifull i HCV-forskning på grunn av deres økte effektivitet i replikasjon av viralt RNA og produksjon av smittsomt virus. Denne cellelinjen viser høye virale titere, som vanligvis når 10⁴ til 10⁵ smittsomme enheter per milliliter i kultursupernatanter under infeksjoner med HCV-JFH1-stammen. Denne egenskapen muliggjør detaljert analyse av viral patogenese og antivirale responser in vitro. Det er viktig å merke seg at Huh-7.5.1-celler brukes i screening for antivirale forbindelser som retter seg mot HCV, noe som bidrar til utviklingen av behandlinger mot HCV og gir innsikt i resistensmekanismer.

I tillegg har cellene blitt brukt i bredere studier som omfatter virale interaksjoner med vertscellens maskineri, lipidmetabolisme og relaterte terapeutiske mål. For eksempel har hemming av cellulære signalveier, slik som den SKI-1/S1P-protease-medierte SREBP-signalveien, vist seg å ha innvirkning på virusreplikasjonen i Huh-7.5.1-celler, noe som understreker deres nytteverdi for forskning på vertsrettede antivirale strategier.

Vev
Lever
Sykdom
Hepatocellulært karsinom hos voksne
Synonymer
  • Huh 7.5.1
  • Huh7.5.1

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Identifikatorer

Kildehenvisning
Huh-7.5.1 (Cytion-katalognummer 305491)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_E049

04Uttrykk og mottakelighet

Mutasjonsprofil
Mutasjon: KDR, p.Gln472His (c.1416A>T), homozygot; Mutasjon: POLD3, p.Lys109Arg (c.326A>G) (p.Lys70Arg, c.209A>G); Mutasjon: RIGI, p.Thr55Ile (c.164C>T); Mutasjon: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T); Mutasjon: TP53, p.Tyr220Cys (c.659A>G), homozygot
Virusfølsomhet
Sammenlignet med den opprinnelige Huh-7-cellelinjen gir den økt produksjon av hepatitt C-virus (HCV) ved infeksjon med stammen JFH-1.

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Såtetthet
2–4 × 10⁴/cm²
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
57 år
Etnisitet
Japansk