الانتقال إلى المحتوى
Huh-7.5.1
الأنسجة
الكبد
المرض
سرطان الخلايا الكبدية لدى البالغين
المرادفات
Huh 7.5.1, Huh7.5.1

المستندات

Huh-7.5.1

Cell line · رقم المنتج 305491

سلسلة الخلايا Huh-7.5.1 هي مستنسخ فرعي مشتق من خلايا سرطان الكبد Huh-7، وتشتهر بقدرتها المعززة على السماح بتكاثر فيروس التهاب الكبد C (HCV)....

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

يُعد خط الخلايا Huh-7.5.1 مستنسخًا فرعيًّا مشتقًا من خلايا سرطان الكبد Huh-7، ويشتهر بزيادة قابليته لتكاثر فيروس التهاب الكبد C (HCV). وقد تم تطوير خلايا Huh-7.5.1 كنسخة محسّنة من خط الخلايا Huh-7.5، حيث تم إنشاؤها من خط خلايا ريبليكون لفيروس التهاب الكبد C تم شفاؤه، وتُظهر قابلية أعلى للإصابة بفيروس التهاب الكبد C مقارنة بسابقاتها. وهي قادرة على دعم دورات تكاثر قوية لفيروس التهاب الكبد C، مما يجعلها نموذجًا مفضلاً لدراسة دورات حياة فيروس التهاب الكبد C، بما في ذلك دخول الفيروس، وتكاثر الحمض النووي الريبي (RNA)، وإنتاج الجسيمات المعدية.

وقد كان استخدام خلايا Huh-7.5.1 ذا قيمة خاصة في أبحاث فيروس التهاب الكبد C (HCV) نظرًا لفعاليتها المتزايدة في تكاثر الحمض النووي الريبي الفيروسي (RNA) وإنتاج الفيروسات المعدية. يُظهر هذا الخط الخلوي عيارًا فيروسيًا مرتفعًا، يصل عادةً إلى 10⁴ إلى 10⁵ وحدة معدية لكل ملليلتر في السوائل الفوقية للزراعة أثناء الإصابة بسلالة HCV-JFH1. تتيح هذه الخاصية إجراء تحليل مفصل لآلية التسبب الفيروسي والاستجابات المضادة للفيروسات في المختبر. والأهم من ذلك، تُستخدم خلايا Huh-7.5.1 في فحص المركبات المضادة للفيروسات التي تستهدف فيروس التهاب الكبد الوبائي (HCV)، مما يساعد في تطوير علاجات ضد فيروس التهاب الكبد الوبائي (HCV) ويوفر رؤى حول آليات المقاومة.

بالإضافة إلى ذلك، استُخدمت هذه الخلايا في دراسات أوسع نطاقًا تتناول التفاعلات الفيروسية مع آليات الخلية المضيفة، واستقلاب الدهون، والأهداف العلاجية ذات الصلة. على سبيل المثال، أظهر تثبيط المسارات الخلوية مثل مسار SREBP الذي يتوسطه بروتياز SKI-1/S1P تأثيرات على تكاثر الفيروس داخل خلايا Huh-7.5.1، مما يسلط الضوء على فائدتها في البحث في الاستراتيجيات المضادة للفيروسات الموجهة نحو المضيف.

الأنسجة
الكبد
المرض
سرطان الخلايا الكبدية لدى البالغين
المرادفات
  • Huh 7.5.1
  • Huh7.5.1

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03المعرّفات

المرجع
Huh-7.5.1 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305491)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_E049

04التعبير والقابلية للإصابة

الأنماط الطفريّة
الطفرة: KDR، p.Gln472His (c.1416A>T)، متماثلة؛ الطفرة: POLD3، p.Lys109Arg (c.326A>G) (p.Lys70Arg، c.209A>G)؛ الطفرة: RIGI، p.Thr55Ile (c.164C>T)؛ الطفرة: TERT، c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T)؛ الطفرة: TP53، p.Tyr220Cys (c.659A>G)، متماثلة
قابلية الإصابة بالفيروس
بالمقارنة مع سلالة الخلايا الأم «Huh-7»، تتيح هذه السلالة إنتاجًا محسّنًا لفيروس التهاب الكبد الوبائي سي (HCV) عند إصابتها بالسلالة «JFH-1».

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
كثافة البذر
2-4*10^4/سم²
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
57 سنة
الأصل العرقي
ياباني