Skip to content
Huh-7.5.1
Tissue
ตับ
Disease
มะเร็งตับชนิดเซลล์ตับในผู้ใหญ่
Synonyms
Huh 7.5.1, Huh7.5.1

Documents

Huh-7.5.1

Cell line · Product number 305491

The Huh-7.5.1 cell line is a subclone derived from the Huh-7 hepatoma cells, known for its enhanced permissiveness to hepatitis C virus (HCV) replication....

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ Huh-7.5.1 เป็นซับโคลนที่แยกมาจากเซลล์มะเร็งตับ Huh-7 ซึ่งรู้จักกันดีว่ามีความไวต่อการจำลองตัวของไวรัสตับอักเสบซี (HCV) ที่สูงขึ้น เซลล์ Huh-7.5.1 ซึ่งพัฒนาขึ้นเป็นเวอร์ชันที่ปรับปรุงจากสายเซลล์ Huh-7.5 ได้รับการสร้างขึ้นจากสายเซลล์รีพลิคอน HCV ที่ได้รับการรักษาแล้ว และแสดงให้เห็นถึงความไวต่อการติดเชื้อ HCV ที่สูงกว่าเมื่อเทียบกับรุ่นก่อน เซลล์เหล่านี้สามารถสนับสนุนวงจรการจำลองตัวของ HCV ได้อย่างแข็งแกร่ง ซึ่งทำให้พวกมันเป็นแบบจำลองที่ได้รับความนิยมในการศึกษาวงจรชีวิตของ HCV รวมถึงการเข้าสู่เซลล์ของไวรัส การจำลองตัว RNA และการผลิตอนุภาคที่ติดเชื้อ

การใช้เซลล์ Huh-7.5.1 มีประโยชน์อย่างยิ่งในการวิจัย HCV เนื่องจากประสิทธิภาพที่เพิ่มขึ้นในการจำลอง RNA ของไวรัสและการผลิตไวรัสที่ติดเชื้อ สายเซลล์นี้แสดงระดับไวรัสสูง โดยทั่วไปจะถึง 10⁴ ถึง 10⁵ หน่วยติดเชื้อต่อมิลลิลิตรในน้ำเลี้ยงเซลล์ระหว่างการติดเชื้อด้วยสายพันธุ์ HCV-JFH1 คุณสมบัตินี้ช่วยให้สามารถวิเคราะห์กลไกการก่อโรคของไวรัสและปฏิกิริยาต้านไวรัสในหลอดทดลองได้อย่างละเอียด ที่สำคัญคือ เซลล์ Huh-7.5.1 ถูกนำมาใช้ในการคัดกรองสารต้านไวรัสที่มุ่งเป้าไปที่ HCV ซึ่งช่วยในการพัฒนาวิธีการรักษาโรค HCV และให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับกลไกการต้านทาน

นอกจากนี้ เซลล์เหล่านี้ยังถูกใช้ในงานวิจัยที่กว้างขึ้น ซึ่งเกี่ยวข้องกับการปฏิสัมพันธ์ของไวรัสกับกลไกของเซลล์เจ้าบ้าน การเผาผลาญไขมัน และเป้าหมายการรักษาที่เกี่ยวข้อง ตัวอย่างเช่น การยับยั้งเส้นทางเซลล์ เช่น เส้นทาง SREBP ที่ถูกควบคุมโดยโปรตีเอส SKI-1/S1P ได้แสดงให้เห็นถึงผลกระทบต่อการจำลองตัวของไวรัสภายในเซลล์ Huh-7.5.1 ซึ่งเน้นย้ำถึงประโยชน์ของเซลล์เหล่านี้ในการวิจัยเกี่ยวกับกลยุทธ์ต้านไวรัสที่มุ่งเป้าไปที่โฮสต์

Tissue
ตับ
Disease
มะเร็งตับชนิดเซลล์ตับในผู้ใหญ่
Synonyms
  • Huh 7.5.1
  • Huh7.5.1

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Identifiers

Citation
Huh-7.5.1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305491)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_E049

04Expression and susceptibility

Mutational profile
การกลายพันธุ์: KDR, p.Gln472His (c.1416A>T), แบบโฮโมไซกัส; การกลายพันธุ์: POLD3, p.Lys109Arg (c.326A>G) (p.Lys70Arg, c.209A>G); การกลายพันธุ์: RIGI, p.Thr55Ile (c.164C>T); การกลายพันธุ์: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T); การกลายพันธุ์: TP53, p.Tyr220Cys (c.659A>G), แบบโฮโมไซโกต
Virus susceptibility
เมื่อเทียบกับสายเซลล์แม่ Huh-7 สายเซลล์นี้ช่วยให้การผลิตไวรัสตับอักเสบซี (HCV) เพิ่มขึ้นเมื่อถูกติดเชื้อด้วยสายพันธุ์ JFH-1

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Seeding density
2–4 × 10⁴/cm²
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
57 ปี
Ethnicity
ญี่ปุ่น