.jpg)
- Tissue
- כליה
- Disease
- קרצינומה פפילרית
- Synonyms
- CAKI-2, CaKi-2, caki-2, CAKI 2, Caki 2, Caki2, CAKI2
Documents
01General information
- Description
Caki-2 הוא קו תאים של קרצינומה של תאי כליה שקופים (ccRCC) בבני אדם, המציג מורפולוגיה אפיתלית ודבק בתנאי תרבית במבחנה. הוא משמש כמודל פרה-קליני חיוני לחקר מנגנוני סרטן הכליה ותגובות טיפוליות. קו Caki-2 בולט במיוחד בעמידותו לחומרים כימותרפיים מסוימים; הוא מציג רגישות מופחתת ל-5-fluorouracil ולמעכב המולטי-קינאז sorafenib, המכוון ל-VEGFRs 1-3, PDGFR-b ו-Raf-1, בהשוואה לקו התאים Caki-1. רגישות דיפרנציאלית זו משמעותית לחקר מנגנוני עמידות לתרופות ולהערכת אסטרטגיות טיפוליות חדשות בקרצינומה של תאי הכליה.
הרקע הגנטי של תאי Caki-2 כולל מוטציה של אובדן תפקוד בחלבון מדכא הגידול von Hippel-Lindau (VHL), המאפיין של ccRCCs רבים המוביל לדיס-רגולציה של גורמים המושרים על ידי היפוקסיה (HIFs) ותורם להתפתחות גידולים. היכולת של תאי Caki-2 ליצור גידולים בעכברים עם מערכת חיסונית מוחלשת הופכת אותם לכלי חשוב למחקרים in vivo על התפתחות סרטן וגרורות, ומספקת תובנות על סביבת הגידול ועל התערבויות טיפוליות אפשריות. השימוש בהם מתרחב לחקר תפקידו של VHL בהתקדמות הסרטן ולבדיקת היעילות של תרופות המכוונות למסלול HIF ולמפל סיגנלים נלווים אחרים בתנאי ניסוי מבוקרים.
- Tissue
- כליה
- Disease
- קרצינומה פפילרית
- Synonyms
- CAKI-2
- CaKi-2
- caki-2
- CAKI 2
- Caki 2
- Caki2
- CAKI2
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל. מאפיינים אולטרא-מבניים כוללים מיקרו-וילי ומיקרו-פילמנטים. מעט מיטוכונדריה, ליזוזומים או טיפות שומן. גופים רב-שכביים תכופים. ללא חלקיקי נגיף.
- Tumourigenic
- כן, בעכברים עירומים. יוצר קרצינומה של תאים ברורים
- Karyotype
- (P8) היפופנטפלואידי עד היפוהקספלואידי (+A2, +A3, +B, +C, +D, +F, +G, -A) עם חריגות הכוללות דיצנטריות, שברי אקרוצנטריות, דקות, שברים וסמנים סובטלוצנטריים גדולים
04Identifiers
- Citation
- Caki-2 (מספר קטלוגי Cytion 300140)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0235
05Expression and susceptibility
- Isoenzymes
- Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, תוצר תדירות הפנוטיפ: 0.0511
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 1 x 104 תאים/סמ"ר יניבו שכבה חד-תאית צפופה ב-90% תוך כ-4 ימים.
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Post-thaw recovery
- לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 69 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes