.jpg)
- Ιστός
- Νεφρός
- Ασθένεια
- Θηλώδες καρκίνωμα
- Συνώνυμα
- CAKI-2, CaKi-2, caki-2, CAKI 2, Caki 2, Caki2, CAKI2
Έγγραφα
Κύτταρα Caki-2
Cell line · Αριθμός προϊόντος 300140
Η Caki-2 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκινώματος των νεφρικών κυττάρων με διαυγή κύτταρα (ccRCC) που παρουσιάζει επιθηλιακή μορφολογία και προσκολλάται υπό συνθήκες καλλιέργειας in vitro. Αυτή...
Προσαρμογή / Προτάσεις
- Κύτταρα Caki-2Cell line€430.00
01Γενικές πληροφορίες
- Περιγραφή
Το Caki-2 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά καθαροκυτταρικού νεφροκυτταρικού καρκινώματος (ccRCC) που παρουσιάζει επιθηλιακή μορφολογία και προσκολλάται σε συνθήκες καλλιέργειας in vitro. Χρησιμεύει ως βασικό προκλινικό μοντέλο για τη διερεύνηση των μηχανισμών του νεφρικού καρκίνου και των θεραπευτικών αποκρίσεων. Η σειρά Caki-2 είναι ιδιαίτερα αξιοσημείωτη για την ανθεκτικότητά της σε ορισμένους χημειοθεραπευτικούς παράγοντες- εμφανίζει μειωμένη ευαισθησία στην 5-φθοροουρακίλη και στον αναστολέα πολλαπλών κινασών sorafenib, ο οποίος στοχεύει τους VEGFRs 1-3, PDGFR-b και Raf-1, σε σύγκριση με την κυτταρική σειρά Caki-1. Αυτή η διαφορετική ευαισθησία είναι σημαντική για τη μελέτη των μηχανισμών αντίστασης στα φάρμακα και την αξιολόγηση νέων θεραπευτικών στρατηγικών στο νεφροκυτταρικό καρκίνωμα.
Το γενετικό υπόβαθρο των κυττάρων Caki-2 περιλαμβάνει μια μετάλλαξη με απώλεια λειτουργίας στην ογκοκατασταλτική πρωτεΐνη von Hippel-Lindau (VHL), χαρακτηριστικό γνώρισμα πολλών ccRCC που οδηγεί στην απορρύθμιση των παραγόντων που επάγονται από την υποξία (HIFs) και συμβάλλει στην καρκινογένεση. Η ικανότητα των κυττάρων Caki-2 να σχηματίζουν όγκους σε ανοσοκατεσταλμένα ποντίκια τα καθιστά πολύτιμο εργαλείο για in vivo μελέτες της ανάπτυξης και της μετάστασης του καρκίνου, παρέχοντας πληροφορίες για το περιβάλλον του όγκου και πιθανές θεραπευτικές παρεμβάσεις. Η χρήση τους επεκτείνεται στη διερεύνηση του ρόλου του VHL στην εξέλιξη του καρκίνου και στη δοκιμή της αποτελεσματικότητας φαρμάκων που στοχεύουν το μονοπάτι HIF και άλλους συναφείς σηματοδοτικούς καταρράκτες σε μια ελεγχόμενη πειραματική διάταξη.
- Ιστός
- Νεφρός
- Ασθένεια
- Θηλώδες καρκίνωμα
- Συνώνυμα
- CAKI-2
- CaKi-2
- caki-2
- CAKI 2
- Caki 2
- Caki2
- CAKI2
02Ταξινόμηση
- Οργανισμός
- Άνθρωπος
- Σεξ
- Άνδρας
- Ιδιότητες ανάπτυξης
- Πιστός
- Επίπεδο βιοασφάλειας
- 1
03Χαρακτηριστικά
- Μορφολογία
- Επιθηλιοειδής. Τα υπερδομικά χαρακτηριστικά περιλαμβάνουν microvilli και μικροϊνίδια. Λίγα μιτοχόνδρια, λυσοσώματα ή σταγονίδια λιπιδίων. Συχνά πολυκυτταρικά σώματα. Δεν υπάρχουν σωματίδια ιού.
- Ογκογόνος
- Ναι, σε γυμνά ποντίκια. Σχηματίζει καθαροκυτταρικό καρκίνωμα
- Καρυότυπος
- (P8) υποπενταπλοειδής έως υποεξαπλοειδής (+A2, +A3, +B, +C, +D, +F, +G, -A) με ανωμαλίες που περιλαμβάνουν δικεντρικά, ακροκεντρικά θραύσματα, λεπτά, διαλείμματα και μεγάλους υποτελοκεντρικούς δείκτες
04Αναγνωριστικά
- Παραπομπή
- Caki-2 (αριθμός καταλόγου Cytion 300140)
- Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
- 9606
- Κελλοσαύρος
- CVCL_0235
05Έκφραση και ευαισθησία
- Ισοένζυμα
- Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Προϊόν συχνότητας φαινοτύπου: 0.0511
06Χειρισμός και καλλιέργεια
- Θρεπτικό μέσο
- RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
- Ατμόσφαιρα επώασης
37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.
- Συμπληρώματα
- Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
- Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
- Accutase
- Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
- Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
- Πυκνότητα σποράς
- 1 x 104 κύτταρα/cm2 θα οδηγήσει σε 90% συγκλίνουσα μονοστρωματική επίστρωση σε περίπου 4 ημέρες.
- Ανανέωση υγρών
- 2 έως 3 φορές την εβδομάδα
- Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
- Μετά την απόψυξη, τοποθετήστε τα κύτταρα σε πλάκα με πυκνότητα 5 x 104 κύτταρα/cm2 και αφήστε τα κύτταρα να αναρρώσουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες.
- Απόψυξη και καλλιέργεια
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση
- Στειρότητα
Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.
Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.
- Μέσο κατάψυξης
- Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
- Συνθήκες αποθήκευσης
Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.
- Όροι αποστολής
Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.
08Δωρητής
- Ηλικία δωρητή
- 69 χρόνια
- Εθνικότητα
- Καυκάσιος
09Νομικά θέματα και ασφάλεια
- Μέτρα ασφαλείας
- Όταν σχεδιάζετε να αποθηκεύσετε ένα κρυοφιαλίδιο σε υγρό άζωτο για μελλοντική απόψυξη, είναι υποχρεωτικό να τηρείτε αυστηρά μέτρα ασφαλείας. Τα κατάλληλα προστατευτικά γάντια και ο κατάλληλος προστατευτικός ρουχισμός είναι απαραίτητα, ενώ απαιτείται η χρήση μάσκας προσώπου ή γυαλιών ασφαλείας κατά τη μεταφορά κατεψυγμένων δειγμάτων προς ή από τη δεξαμενή υγρού αζώτου. Αυτό γίνεται για να μετριαστεί ο κίνδυνος τραυματισμού από πιθανές εκρήξεις κρυοσωλήνων κατά την απομάκρυνση, οι οποίες μπορεί να οδηγήσουν στην προβολή αιχμηρών θραυσμάτων.
- Εγγύηση
Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος
Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης
- Απαιτείται συμφωνία μεταφοράς υλικού
- Ναι