Gå direkte til indholdet
Caki-2-celler
Væv
Nyre
Sygdom
Papillært karcinom
Synonymer
CAKI-2, CaKi-2, caki-2, CAKI 2, Caki 2, Caki2, CAKI2

Dokumenter

Caki-2-celler

Cell line · Varenummer 300140

Caki-2 er en human cellinje fra et klarcellet nyrecellekarcinom (ccRCC), der udviser epitelial morfologi og vedhæfter sig under in vitro-dyrkningsbetingelser. Den...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Caki-2 er en human klarcellet nyrecellekarcinom (ccRCC) cellelinje, der udviser epitelial morfologi og klæber under in vitro-kulturforhold. Den fungerer som en vigtig præklinisk model til undersøgelse af nyrekræftmekanismer og terapeutiske reaktioner. Caki-2-cellelinjen er især kendt for sin resistens over for visse kemoterapeutiske midler; den udviser nedsat følsomhed over for 5-fluorouracil og multikinasehæmmeren sorafenib, som er rettet mod VEGFR 1-3, PDGFR-b og Raf-1, sammenlignet med Caki-1-cellelinjen. Denne forskellige følsomhed er vigtig for studiet af resistensmekanismer og evalueringen af nye terapeutiske strategier for nyrecellekarcinom.

Caki-2-cellernes genetiske baggrund omfatter en mutation med tab af funktion i von Hippel-Lindau (VHL)-tumorsuppressorproteinet, et kendetegn for mange ccRCC'er, som fører til deregulering af hypoxi-inducerbare faktorer (HIF'er) og bidrager til tumorigenese. Caki-2-cellernes evne til at danne tumorer i immunkompromitterede mus gør dem til et værdifuldt værktøj til in vivo-undersøgelser af kræftvækst og metastase, hvilket giver indsigt i tumormiljøet og potentielle terapeutiske indgreb. De kan også bruges til at udforske VHL's rolle i kræftprogression og til at teste effekten af lægemidler rettet mod HIF-vejen og andre tilknyttede signalkaskader i en kontrolleret forsøgsopstilling.

Væv
Nyre
Sygdom
Papillært karcinom
Synonymer
  • CAKI-2
  • CaKi-2
  • caki-2
  • CAKI 2
  • Caki 2
  • Caki2
  • CAKI2

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende. Ultrastrukturelle træk omfatter mikrovilli og mikrofilamenter. Få mitokondrier, lysosomer eller lipiddråber. Hyppige multilamellære legemer. Ingen viruspartikler.
Tumorfremkaldende
Yeees, i nøgne mus. Danner klarcellet karcinom
Karyotype
(P8) hypopentaploid til hypohexaploid (+A2, +A3, +B, +C, +D, +F, +G, -A) med abnormiteter, herunder dicentriske, acrocentriske fragmenter, minutter, pauser og store subtelocentriske markører

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Caki-2 (Cytion katalognummer 300140)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0235

05Udtryk og modtagelighed

Isoenzymer
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fænotypefrekvensprodukt: 0.0511

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2 vil resultere i et 90 % konfluent monolag på ca. 4 dage.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
69 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk