Skip to content
เซลล์ Caki-2
Tissue
ไต
Disease
มะเร็งชนิดแพปิลลารี
Synonyms
CAKI-2, CaKi-2, caki-2, CAKI 2, Caki 2, Caki2, CAKI2

Documents

เซลล์ Caki-2

Cell line · Product number 300140

Caki-2 is a human clear cell renal cell carcinoma (ccRCC) cell line that exhibits epithelial morphology and adheres during in vitro culture conditions. It...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description

Caki-2 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งไตชนิดเซลล์ใส (ccRCC) ของมนุษย์ที่มีลักษณะทางสัณฐานวิทยาแบบเยื่อบุผิวและสามารถยึดเกาะได้ภายใต้สภาวะเพาะเลี้ยงในหลอดทดลอง สายพันธุ์นี้ใช้เป็นแบบจำลองก่อนการทดลองในสัตว์ที่จำเป็นสำหรับการศึกษาเชิงกลไกของมะเร็งไตและการตอบสนองต่อการรักษาสายพันธุ์ Caki-2 มีความโดดเด่นเป็นพิเศษในด้านความต้านทานต่อสารเคมีบำบัดบางชนิด โดยแสดงความไวต่อ 5-fluorouracil และตัวยับยั้งเอนไซม์หลายชนิด sorafenib ซึ่งมุ่งเป้าไปที่ VEGFRs 1-3, PDGFR-b และ Raf-1 ลดลงเมื่อเทียบกับสายพันธุ์ Caki-1 ความไวที่แตกต่างกันนี้มีความสำคัญต่อการศึกษาวิถีการดื้อยาและประเมินกลยุทธ์การรักษาใหม่ในมะเร็งไตชนิดเซลล์ไต

พื้นหลังทางพันธุกรรมของเซลล์ Caki-2 ประกอบด้วยการกลายพันธุ์ที่ทำให้สูญเสียการทำงานของโปรตีนยับยั้งการเกิดเนื้องอก von Hippel-Lindau (VHL) ซึ่งเป็นลักษณะเด่นของ ccRCC หลายชนิดที่นำไปสู่การควบคุมที่ไม่สมดุลของปัจจัยที่เหนี่ยวนำโดยภาวะขาดออกซิเจน (HIFs) และมีส่วนช่วยในการเกิดเนื้องอกความสามารถของเซลล์ Caki-2 ในการก่อตัวเป็นเนื้องอกในหนูที่มีภูมิคุ้มกันบกพร่องทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาการเจริญเติบโตและการแพร่กระจายของมะเร็งในร่างกาย (in vivo) ซึ่งช่วยให้เข้าใจสภาพแวดล้อมของเนื้องอกและการแทรกแซงการรักษาที่เป็นไปได้ การใช้เซลล์เหล่านี้ยังขยายไปถึงการสำรวจบทบาทของ VHL ในการพัฒนาของมะเร็งและการทดสอบประสิทธิภาพของยาที่มุ่งเป้าไปที่เส้นทาง HIF และกระบวนการส่งสัญญาณที่เกี่ยวข้องอื่น ๆ ในสภาพแวดล้อมการทดลองที่ควบคุมได้

Tissue
ไต
Disease
มะเร็งชนิดแพปิลลารี
Synonyms
  • CAKI-2
  • CaKi-2
  • caki-2
  • CAKI 2
  • Caki 2
  • Caki2
  • CAKI2

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว คุณลักษณะทางโครงสร้างระดับจุลภาคประกอบด้วยไมโครวิลลัสและไมโครฟิลิเมนต์ มีไมโทคอนเดรีย ไลโซโซม หรือหยดไขมันน้อย พบโครงสร้างหลายชั้นบ่อยครั้ง ไม่มีอนุภาคไวรัส
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่ไม่มีขน เกิดเป็นมะเร็งชนิดเซลล์ใส
Karyotype
(P8) ไฮโปเพนตาพลอยด์ถึงไฮโปเฮกซาพลอยด์ (+A2, +A3, +B, +C, +D, +F, +G, -A) พร้อมความผิดปกติรวมถึงไดเซนทริก, ชิ้นส่วนอะโครเซนทริก, มินิท, การแตกหัก และเครื่องหมายซับเทเลเซนทริกขนาดใหญ่

04Identifiers

Citation
Caki-2 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300140)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0235

05Expression and susceptibility

Isoenzymes
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, ความถี่ของฟีโนไทป์: 0.0511

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 104 เซลล์/cm2 จะทำให้เกิดชั้นเซลล์เดี่ยวที่หนาแน่น 90% ในเวลาประมาณ 4 วัน
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
69 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน