Gå direkt till innehållet
Caki-2-celler
Vävnad
Njurar
Sjukdom
Papillär karcinom
Synonymer
CAKI-2, CaKi-2, caki-2, CAKI 2, Caki 2, Caki2, CAKI2

Caki-2-celler

Cell line · Produktnummer 300140

Caki-2 är en cellinje från humant klarcelligt njurcellskarcinom (ccRCC) som uppvisar epitelial morfologi och fäster vid odling in vitro. Den...

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Caki-2 är en human cellinje för klarcellig njurcancer (ccRCC) som uppvisar epitelial morfologi och adhererar under in vitro-odlingsförhållanden. Den fungerar som en viktig preklinisk modell för att undersöka mekanismerna bakom njurcancer och hur den svarar på behandling. Caki-2-cellinjen är särskilt anmärkningsvärd för sin resistens mot vissa kemoterapeutiska medel; den uppvisar minskad känslighet för 5-fluorouracil och multikinashämmaren sorafenib, som riktar sig mot VEGFR 1-3, PDGFR-b och Raf-1, jämfört med Caki-1-cellinjen. Denna differentierade känslighet är viktig för att studera mekanismer för läkemedelsresistens och utvärdera nya behandlingsstrategier för njurcancer.

Den genetiska bakgrunden hos Caki-2-cellerna inkluderar en förlust av funktion-mutation i tumörsuppressorproteinet von Hippel-Lindau (VHL), ett kännetecken för många ccRCC som leder till deregulering av hypoxia-inducerbara faktorer (HIF) och bidrar till tumörutvecklingen. Caki-2-cellernas förmåga att bilda tumörer i immunkomprometterade möss gör dem till ett värdefullt verktyg för in vivo-studier av cancertillväxt och metastaser, vilket ger insikter om tumörmiljön och potentiella terapeutiska ingrepp. Deras användning sträcker sig till att utforska VHL:s roll i cancerprogression och testa effekten av läkemedel som riktar sig mot HIF-vägen och andra associerade signalkaskader i en kontrollerad experimentell uppställning.

Vävnad
Njurar
Sjukdom
Papillär karcinom
Synonymer
  • CAKI-2
  • CaKi-2
  • caki-2
  • CAKI 2
  • Caki 2
  • Caki2
  • CAKI2

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande. Ultrastrukturella kännetecken inkluderar mikrovilli och mikrofilament. Få mitokondrier, lysosomer eller lipiddroppar. Frekventa multilamellära kroppar. Inga viruspartiklar.
Tumörframkallande
Ja, i nakna möss. Bildar klarcellscarcinom
Karyotyp
(P8) hypopentaploid till hypohexaploid (+A2, +A3, +B, +C, +D, +F, +G, -A) med avvikelser som dikentriker, akrocentriska fragment, minuter, avbrott och stora subtelocentriska markörer

04Identifierare

Källa
Caki-2 (Cytion katalognummer 300140)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0235

05Uttryck och mottaglighet

Isoenzymer
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fenotyp Frekvens Produkt: 0.0511

06Hantering och odling

Odlingsmedium
RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
1 x 104 celler/cm2 ger ett 90 % konfluent monolager på cirka 4 dagar.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
Efter upptining, plattlägg cellerna med 5 x 104 celler/cm2 och låt cellerna återhämta sig från frysprocessen och fästa i minst 24 timmar.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
69 år
Etnicitet
Kaukasisk