Přejít na obsah
Buňky Caki-2
Tkáň
Ledviny
Nemoc
Papilární karcinom
Synonyma
CAKI-2, CaKi-2, caki-2, CAKI 2, Caki 2, Caki2, CAKI2

Dokumenty

Buňky Caki-2

Cell line · Číslo výrobku 300140

Caki-2 je lidská buněčná linie jasnobuněčného renálního karcinomu (ccRCC), která vykazuje epiteliální morfologii a v podmínkách in vitro kultury se přichytává. Tato linie...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Caki-2 je lidská buněčná linie světlobuněčného karcinomu ledviny (ccRCC), která vykazuje epiteliální morfologii a v podmínkách kultivace in vitro adheruje. Slouží jako základní preklinický model pro zkoumání mechanismů vzniku karcinomu ledvin a terapeutických reakcí. Linie Caki-2 se vyznačuje zejména rezistencí vůči některým chemoterapeutickým látkám; ve srovnání s buněčnou linií Caki-1 vykazuje sníženou citlivost vůči 5-fluorouracilu a multikinázovému inhibitoru sorafenibu, který je zaměřen proti VEGFR 1-3, PDGFR-b a Raf-1. Tato rozdílná citlivost je významná pro studium mechanismů rezistence na léky a hodnocení nových terapeutických strategií u karcinomu ledvin.

Genetické pozadí buněk Caki-2 zahrnuje mutaci se ztrátou funkce ve von Hippel-Lindauově (VHL) tumor supresorovém proteinu, což je charakteristický znak mnoha ccRCC, který vede k deregulaci hypoxií indukovaných faktorů (HIF) a přispívá k tumorigenezi. Schopnost buněk Caki-2 vytvářet nádory v imunokompromitovaných myších z nich činí cenný nástroj pro in vivo studie růstu a metastazování nádorů, který poskytuje vhled do nádorového prostředí a potenciálních terapeutických zásahů. Jejich využití se rozšiřuje na zkoumání role VHL v progresi rakoviny a testování účinnosti léků zaměřených na dráhu HIF a další související signální kaskády v kontrolovaném experimentálním uspořádání.

Tkáň
Ledviny
Nemoc
Papilární karcinom
Synonyma
  • CAKI-2
  • CaKi-2
  • caki-2
  • CAKI 2
  • Caki 2
  • Caki2
  • CAKI2

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epiteloidní. Ultrastrukturální znaky zahrnují mikrovilie a mikrofilamenta. Málo mitochondrií, lysozomů nebo lipidových kapének. Častá multilamelární tělíska. Žádné virové částice.
Tumorogenní
Ano, na nahých myších. Tvoří světlobuněčný karcinom
Karyotyp
(P8) hypopentaploidní až hypohexaploidní (+A2, +A3, +B, +C, +D, +F, +G, -A) s abnormalitami včetně dicentrických, akrocentrických fragmentů, minut, zlomů a velkých subtelocentrických markerů

04Identifikátory

Citace
Caki-2 (katalogové číslo Cytion 300140)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0235

05Exprese a náchylnost

Isoenzymy
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fenotyp Frekvence produktu: 0.0511

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2 bude mít za následek 90% konfluentní monovrstvu za přibližně 4 dny.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
69 let
Etnická příslušnost
Kavkazský