Preskoči na vsebino
Celice Caki-2
Tkivo
Ledvice
Bolezen
Papilarni karcinom
Sinonimi
CAKI-2, CaKi-2, caki-2, CAKI 2, Caki 2, Caki2, CAKI2

Dokumenti

Celice Caki-2

Cell line · Številka izdelka 300140

Caki-2 je človeška celična linija jasnoceličnega karcinoma ledvičnih celic (ccRCC), ki ima epitelijsko morfologijo in se v pogojih in vitro kulture prilepi na podlago. Ta...

€430.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Caki-2 je človeška celična linija svetloceličnega ledvičnega karcinoma (ccRCC), ki ima epitelijsko morfologijo in se v pogojih gojenja in vitro oprijema. Uporablja se kot pomemben predklinični model za raziskovanje mehanizmov ledvičnega raka in terapevtskih odzivov. Linija Caki-2 je še posebej značilna po svoji odpornosti na nekatera kemoterapevtska zdravila; v primerjavi s celično linijo Caki-1 je manj občutljiva na 5-fluorouracil in večkinazni inhibitor sorafenib, ki deluje na VEGFR 1-3, PDGFR-b in Raf-1. Ta različna občutljivost je pomembna za preučevanje mehanizmov odpornosti na zdravila in ocenjevanje novih terapevtskih strategij pri karcinomu ledvičnih celic.

Genetsko ozadje celic Caki-2 vključuje mutacijo izgube funkcije v tumorskem supresorskem proteinu von Hippel-Lindau (VHL), ki je značilna za številne ccRCC in povzroča deregulacijo hipoksijo inducirajočih dejavnikov (HIF) ter prispeva k tumorigenezi. Zaradi sposobnosti celic Caki-2, da tvorijo tumorje v imunsko oslabljenih miših, so dragoceno orodje za študije rasti in metastaziranja raka in vivo, kar omogoča vpogled v tumorsko okolje in morebitne terapevtske posege. Njihova uporaba je razširjena na raziskovanje vloge VHL pri napredovanju raka in preizkušanje učinkovitosti zdravil, usmerjenih proti poti HIF in drugim povezanim signalnim kaskadam, v nadzorovani eksperimentalni postavitvi.

Tkivo
Ledvice
Bolezen
Papilarni karcinom
Sinonimi
  • CAKI-2
  • CaKi-2
  • caki-2
  • CAKI 2
  • Caki 2
  • Caki2
  • CAKI2

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Podoben epitelijskemu. Ultrastrukturne značilnosti vključujejo mikrovile in mikrofilamente. Malo mitohondrijev, lizosomov ali lipidnih kapljic. Pogosta multilamelarna telesca. Ni virusnih delcev.
Tumorigeničen
Da, na golih miših. Oblikuje svetlocelični karcinom
Kariotip
(P8) hipopentaploidni do hipoheksaploidni (+A2, +A3, +B, +C, +D, +F, +G, -A) z nepravilnostmi, vključno z dicentriki, akrocentričnimi fragmenti, minutami, prekinitvami in velikimi subtelocentričnimi označevalci

04Identifikatorji

Navajanje vira
Caki-2 (kataloška številka Cytion 300140)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0235

05Izražanje in dovzetnost

Izoenzimi
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fenotip Pogostost izdelka: 0.0511

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 x 104 celic/cm2 bo v približno 4 dneh povzročilo 90 % konfluentno monoslojno plast.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
69 let
Etnična pripadnost
Kavkaški