Mine otse sisu juurde
Caki-2 rakud
Kude
Neerud
Haigus
Papillaarkartsinoom
Sünonüümid
CAKI-2, CaKi-2, caki-2, CAKI 2, Caki 2, Caki2, CAKI2

Dokumendid

Caki-2 rakud

Cell line · Toote number 300140

Caki-2 on inimese selge rakuga neerurakk-kartsinoomi (ccRCC) rakuliin, millel on epiteelne morfoloogia ja mis kinnitub in vitro kultiveerimistingimustes. See...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Caki-2 on inimese selge rakulise neerurakk-kartsinoomi (ccRCC) rakuliin, millel on epiteliaalne morfoloogia ja mis kleepub in vitro kasvatustingimustes. See on oluline prekliiniline mudel neeruvähi mehhanismide ja ravivastuste uurimiseks. Caki-2 rakuliin on eriti tähelepanuväärne oma resistentsuse poolest teatavate kemoterapeutiliste ainete suhtes; võrreldes Caki-1 rakuliiniga on see vähem tundlik 5-fluorouratsiili ja multikinaasi inhibiitori sorafeniibi suhtes, mis on suunatud VEGFR 1-3, PDGFR-b ja Raf-1 vastu. See erinev tundlikkus on oluline ravimite resistentsuse mehhanismide uurimiseks ja uute ravistrateegiate hindamiseks neerurakk-kartsinoomi puhul.

Caki-2 rakkude geneetilisel taustal on von Hippel-Lindau (VHL) kasvajasupressorvalgu funktsiooni kadumise mutatsioon, mis on paljude neerukollete iseloomulikuks tunnuseks, mis põhjustab hüpoksia indutseeritavate faktorite (HIF) dereguleerimist ja aitab kaasa tuumorigeneesi tekkimisele. Caki-2 rakkude võime moodustada immuunpuudulikkusega hiirtel kasvajaid teeb neist väärtusliku vahendi vähi kasvu ja metastaaside in vivo uuringuteks, mis annab ülevaate kasvajakeskkonnast ja võimalikest ravimeetoditest. Nende kasutamine laieneb VHL-i rolli uurimisele vähi progresseerumises ning HIF-tee ja teiste sellega seotud signaalkaskaadide vastu suunatud ravimite tõhususe testimisele kontrollitud katsetes.

Kude
Neerud
Haigus
Papillaarkartsinoom
Sünonüümid
  • CAKI-2
  • CaKi-2
  • caki-2
  • CAKI 2
  • Caki 2
  • Caki2
  • CAKI2

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadne. Ultrastruktuursete tunnuste hulka kuuluvad mikrovillid ja mikrofilamendid. Vähesed mitokondrid, lüsosoomid või lipiidipisarad. Sagedased multilamellulaarsed kehad. Viiruseosakesi ei ole.
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel. Moodustab selge rakukartsinoomi
Karyotüüp
(P8) hüpopentaploidne kuni hüpoheksaploidne (+A2, +A3, +B, +C, +D, +F, +G, -A), millel on kõrvalekaldeid, sealhulgas ditsentrilised, akrotsentrilised fragmendid, minutid, katkestused ja suured subtelotsentrilised markerid

04Tunnused

Viide
Caki-2 (Cytioni katalooginumber 300140)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0235

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Isoensüümid
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, fenotüübi sagedustoode: 0.0511

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2 annab umbes 4 päeva jooksul 90% konfluentse monokihi.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
69 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia