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Caki-2細胞
ティッシュ
腎臓
病気
乳頭がん
同義語
CAKI-2, CaKi-2, caki-2, CAKI 2, Caki 2, Caki2, CAKI2

Caki-2細胞

Cell line · 製品番号 300140

Caki-2は、上皮様形態を示し、in vitro培養条件下で付着性を示すヒト明細胞型腎細胞癌(ccRCC)細胞株である。これは……

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01概要

説明

Caki-2はヒト明細胞腎細胞癌(ccRCC)細胞株で、上皮形態を示し、in vitro培養条件下で接着する。この細胞株は腎癌のメカニズムや治療反応を研究するのに不可欠な前臨床モデルである。Caki-2株は、特定の化学療法剤に対する耐性で特に注目されている。Caki-1細胞株と比較して、5-フルオロウラシルや、VEGFR1-3、PDGFR-b、Raf-1を標的とするマルチキナーゼ阻害剤ソラフェニブに対する感受性が低下している。この感受性の差は、腎細胞癌の薬剤耐性メカニズムを研究し、新しい治療戦略を評価する上で重要である。

Caki-2細胞の遺伝的背景には、von Hippel-Lindau(VHL)腫瘍抑制タンパク質の機能喪失変異が含まれており、これは多くのccRCCの特徴であり、低酸素誘導因子(HIF)の調節不全をもたらし、腫瘍形成に寄与する。免疫不全マウスで腫瘍を形成するCaki-2細胞の能力は、癌の増殖と転移のin vivo研究のための貴重なツールであり、腫瘍環境と潜在的な治療介入に関する洞察を提供する。Caki-2細胞の利用は、癌の進行におけるVHLの役割の探索や、HIF経路や他の関連シグナル伝達カスケードを標的とする薬剤の有効性を、制御された実験セットアップで試験することにも及ぶ。

ティッシュ
腎臓
病気
乳頭がん
同義語
  • CAKI-2
  • CaKi-2
  • caki-2
  • CAKI 2
  • Caki 2
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  • CAKI2

02分類

生物
人間
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様。超微細構造的特徴には微絨毛とミクロフィラメントが含まれる。ミトコンドリア、リソソームまたは脂質滴は少ない。多層膜小体が多い。ウイルス粒子はない。
腫瘍形成性
はい、ヌードマウスで。明細胞癌を形成
核型
(P8)低倍数体から低倍数体(+A2、+A3、+B、+C、+D、+F、+G、-A)で、ダイセントリック、アクロセントリックフラグメント、ミニッツ、ブレーク、大きなサブテロセントリックマーカーなどの異常がある。

04識別子

引用
Caki-2 (Cytion カタログ番号 300140)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_0235

05発現と感受性

アイソザイム
Me-2、1、PGM3、1、PGM1、1、ES-D、1、AK-1、1、GLO-1、1-2、G6PD、B、表現型頻度製品: 0.0511

06取り扱いと飼育

培地
RPMI1640、w:2.0mM安定グルタミン、w:2.0g/L NaHCO3(Cytion article number 820700a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
1×10⁴細胞/cm²の播種密度では、約4日で90%のコンフルエント単層が形成される
流体の更新
週2~3回
解凍後の回復
解凍後、細胞を5×10⁴細胞/cm²で播種し、凍結処理からの回復と接着を少なくとも24時間以上行う。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
69年
民族
白人