Pereiti prie turinio
Caki-2 ląstelės
Audinys
Inkstai
Liga
Papiliarinė karcinoma
Sinonimai
CAKI-2, CaKi-2, caki-2, CAKI 2, Caki 2, Caki2, CAKI2

Dokumentai

Caki-2 ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300140

„Caki-2“ – tai žmogaus skaidriųjų ląstelių inkstų karcinomos (ccRCC) ląstelių linija, pasižyminti epiteline morfologija ir gebanti prisitvirtinti in vitro kultivavimo sąlygomis. Ji...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

Caki-2 yra žmogaus šviesiųjų ląstelių inkstų ląstelių karcinomos (ccRCC) ląstelių linija, kuriai būdinga epitelio morfologija ir kuri in vitro kultūrų sąlygomis yra lipni. Ji yra svarbus ikiklinikinis modelis inkstų vėžio mechanizmams ir terapiniam atsakui tirti. Caki-2 linija ypač išsiskiria atsparumu tam tikriems chemoterapiniams preparatams; palyginti su Caki-1 ląstelių linija, ji mažiau jautri 5-fluorouracilui ir daugiakinazės inhibitoriui sorafenibui, kuris veikia VEGFR 1-3, PDGFR-b ir Raf-1. Šis skirtingas jautrumas yra svarbus tiriant atsparumo vaistams mechanizmus ir vertinant naujas inkstų ląstelių karcinomos gydymo strategijas.

Caki-2 ląstelių genetiniame fone yra von Hippel-Lindau (VHL) naviką slopinančio baltymo funkcijos praradimo mutacija, būdinga daugeliui ccRCC, dėl kurios sutrinka hipoksiją indukuojančių veiksnių (HIF) reguliacija ir prisideda prie naviko genezės. Caki-2 ląstelių gebėjimas formuoti navikus imunokompromituotose pelėse daro jas vertingu vėžio augimo ir metastazių in vivo tyrimų įrankiu, suteikiančiu galimybę susipažinti su naviko aplinka ir galimomis terapinėmis intervencijomis. Jų panaudojimas apima ir VHL vaidmens vėžio progresavimui tyrimą bei vaistų, nukreiptų į HIF kelią ir kitas susijusias signalų kaskadas, veiksmingumo tikrinimą kontroliuojamoje eksperimentinėje aplinkoje.

Audinys
Inkstai
Liga
Papiliarinė karcinoma
Sinonimai
  • CAKI-2
  • CaKi-2
  • caki-2
  • CAKI 2
  • Caki 2
  • Caki2
  • CAKI2

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Panašus į epitelį. Ultrastruktūriniai požymiai: mikroviliukai ir mikrofilamentai. Mažai mitochondrijų, lizosomų ar lipidų lašelių. Dažni multilameliariniai kūneliai. Nėra viruso dalelių.
Tumorogeninis
Taip, nuogoms pelėms. Formuojasi šviesiųjų ląstelių karcinoma
Kariotipas
(P8) nuo hipopentaploidinių iki hipoheksaploidinių (+A2, +A3, +B, +C, +D, +F, +G, -A) su anomalijomis, įskaitant dicentrikus, akrocentrinius fragmentus, minutes, lūžius ir dideles subtelocentrines žymes

04Identifikatoriai

Nuoroda
Caki-2 (Cytion katalogo numeris 300140)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0235

05Išraiška ir jautrumas

Izofermentai
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fenotipo dažnio produktas: 0.0511

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1 x 104 ląstelės/cm2 per maždaug 4 dienas sudarys 90 % konfluentinį monosluoksnį.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
69 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių