Pāriet uz saturu
Caki-2 šūnas
Audums
Nieres
Slimība
Papilārā karcinoma
Sinonīmi
CAKI-2, CaKi-2, caki-2, CAKI 2, Caki 2, Caki2, CAKI2

Dokumenti

Caki-2 šūnas

Cell line · Preces numurs 300140

„Caki-2“ ir cilvēka skaidru šūnu nieru šūnu karcinomas (ccRCC) šūnu līnija, kurai piemīt epitēlija morfoloģija un kura in vitro kultivēšanas apstākļos piestiprinās pie virsmas. Tā...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Caki-2 ir cilvēka gaišššūnu nierakmeņu karcinomas (ccRCC) šūnu līnija, kurai ir epitēlija morfoloģija un kura in vitro kultūras apstākļos adherē. Tā kalpo kā būtisks preklīnisks modelis nieru vēža mehānismu un terapeitiskās atbildes reakcijas izpētei. Caki-2 līnija īpaši izceļas ar rezistenci pret noteiktiem ķīmijterapeitiskiem līdzekļiem; salīdzinājumā ar Caki-1 šūnu līniju tā ir mazāk jutīga pret 5-fluoruracilu un multi-kināzes inhibitoru sorafenibu, kas ir vērsts pret VEGFR 1-3, PDGFR-b un Raf-1. Šī atšķirīgā jutība ir nozīmīga zāļu rezistences mehānismu izpētei un jaunu terapeitisko stratēģiju novērtēšanai nieru šūnu karcinomas gadījumā.

Caki-2 šūnu ģenētiskais fons ietver von Hippel-Lindau (VHL) audzēja supresora proteīna funkciju zaudējušu mutāciju, kas ir raksturīga daudziem ccRCC, kas izraisa hipoksiju inducējošo faktoru (HIF) deregulāciju un veicina audzēju veidošanos. Caki-2 šūnu spēja veidot audzējus imūnkompromitētās pelēs padara tās par vērtīgu rīku vēža augšanas un metastāžu pētījumiem in vivo, sniedzot ieskatu par audzēja vidi un iespējamiem terapeitiskiem pasākumiem. Tās var izmantot, pētot VHL lomu vēža progresēšanā un pārbaudot HIF ceļu un citas saistītās signalizācijas kaskādes kontrolētā eksperimentālā vidē.

Audums
Nieres
Slimība
Papilārā karcinoma
Sinonīmi
  • CAKI-2
  • CaKi-2
  • caki-2
  • CAKI 2
  • Caki 2
  • Caki2
  • CAKI2

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs. Ultrastrukturālās iezīmes ietver mikrovilus un mikrofilamentus. Maz mitohondriju, lizosomu vai lipīdu pilienu. Bieži multilamelāri ķermeņi. Nav vīrusa daļiņu.
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm. Veido gaiššūnu karcinomu
Kariotips
(P8) hipopentaploīds līdz hipoheksaploīds (+A2, +A3, +B, +C, +D, +F, +G, -A) ar anomālijām, tostarp dicentriķiem, acrocentriskiem fragmentiem, minūtēm, pārtraukumiem un lieliem subtelocentriskiem marķieriem

04Identifikatori

Atsauce
Caki-2 (Cytion kataloga numurs 300140)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0235

05Pazīmes un uzņēmība

Izoenzīmi
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Fenotipu biežuma produkts: 0.0511

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2 radīs 90 % konfluentu monoslāni aptuveni 4 dienu laikā.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
69 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis