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Células Caki-2
Tissue
Riñón
Disease
Carcinoma papilar
Synonyms
CAKI-2, CaKi-2, caki-2, CAKI 2, Caki 2, Caki2, CAKI2

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Células Caki-2

Cell line · Product number 300140

Caki-2 is a human clear cell renal cell carcinoma (ccRCC) cell line that exhibits epithelial morphology and adheres during in vitro culture conditions. It...

US$395.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

Caki-2 es una línea celular de carcinoma renal de células claras (ccRCC) humano que presenta una morfología epitelial y se adhiere en condiciones de cultivo in vitro. Sirve como modelo preclínico esencial para la investigación de los mecanismos del cáncer renal y las respuestas terapéuticas. La línea Caki-2 se destaca particularmente por su resistencia a ciertos agentes quimioterapéuticos; muestra una menor sensibilidad al 5-fluorouracilo y al inhibidor multiquinasa sorafenib —que actúa sobre los receptores VEGFR 1-3, PDGFR-b y Raf-1— en comparación con la línea celular Caki-1. Esta sensibilidad diferencial es importante para estudiar los mecanismos de resistencia a los fármacos y evaluar nuevas estrategias terapéuticas en el carcinoma de células renales.

El trasfondo genético de las células Caki-2 incluye una mutación con pérdida de función en la proteína supresora de tumores von Hippel-Lindau (VHL), una característica distintiva de muchos carcinomas renales con células claras (ccRCC) que conduce a la desregulación de los factores inducibles por hipoxia (HIF) y contribuye a la tumorigénesis. La capacidad de las células Caki-2 para formar tumores en ratones inmunodeprimidos las convierte en una herramienta valiosa para estudios in vivo del crecimiento y la metástasis del cáncer, lo que brinda información sobre el entorno tumoral y posibles intervenciones terapéuticas. Su uso se extiende a la exploración del papel de VHL en la progresión del cáncer y a la evaluación de la eficacia de fármacos dirigidos a la vía de los HIF y otras cascadas de señalización asociadas en un entorno experimental controlado.

Tissue
Riñón
Disease
Carcinoma papilar
Synonyms
  • CAKI-2
  • CaKi-2
  • caki-2
  • CAKI 2
  • Caki 2
  • Caki2
  • CAKI2

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial. Las características ultraestructurales incluyen microvellosidades y microfilamentos. Pocas mitocondrias, lisosomas o gotitas lipídicas. Cuerpos multilamelares frecuentes. No se observan partículas virales.
Tumourigenic
Sí, en ratones desnudos. Provoca carcinoma de células claras
Karyotype
(P8) hipopentaploide a hipohexaploide (+A2, +A3, +B, +C, +D, +F, +G, -A) con anomalías que incluyen dicéntricos, fragmentos acrocéntricos, cromosomas minúsculos, roturas y marcadores subtelocéntricos grandes

04Identifiers

Citation
Caki-2 (número de catálogo de Cytion 300140)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0235

05Expression and susceptibility

Isoenzymes
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Producto de frecuencia fenotípica: 0,0511

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, con 2,0 mM de glutamina estable y 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion: 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Añade al medio un 10 % de FBS
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Seeding density
1 x 10⁴ células/cm² dará como resultado una monocapa con una confluencia del 90 % en aproximadamente 4 días
Fluid renewal
De 2 a 3 veces por semana
Post-thaw recovery
Después de descongelarlas, siembre las células a una densidad de 5 × 10⁴ células/cm² y deje que se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

08Donor

Donor age
69 años
Ethnicity
caucásico