01General information
- Description
קו התאים COX הוא קו תאים B-לימפוציטואידי (B-LCL) המופק מתורם אנושי ומומר באמצעות נגיף אפשטיין-בר (EBV). הוא משמש לעתים קרובות במחקר אימונוגנטיקה והיסטו-תאימות בשל הכללתו בפאנלים של הקבוצה הבינלאומית לעבודה בתחום ההיסטו-תאימות (IHWG). קו התאים COX מייצג הפלוטיפ ספציפי של קומפלקס היסטו-תאיות עיקרי (MHC), HLA-A1-B8-Cw7-DR3-DQ2, הקשור לרגישות למחלות אוטואימוניות כגון סוכרת מסוג 1, זאבת אדמנתית מערכתית ומיאסטניה גרביס. הפלוטיפ זה בולט ברמת חוסר האיזון הגבוהה שלו, מה שהופך את קו התאים למודל חיוני לחקר הקשרים הגנטיים הקשורים ל-MHC.
הרצף הגנומי של ההפלוטיפ COX אופיין במלואו במסגרת פרויקט MHC Haplotype. הוא משתרע על פני כ-4.8 Mb, וכולל את אזורי MHC מסוג I, II ו-III, וכן את אזור סוג I המורחב. ריצוף מפורט חשף מעל 16,000 פולימורפיזמים של נוקלאוטיד בודד (SNP) וריבוי וריאציות מבניות, המספקים תובנות על המבנה הגנטי של אזור זה. האפיון המקיף של MHC בקו התאים COX הופך אותו למשאב מרכזי להבנת תפקוד מערכת החיסון והבסיס הגנטי של מחלות הקשורות ל-HLA.
במחקר, קו התאים COX משמש למיפוי מדויק של לוקוסים הקשורים למחלות בתוך ה-MHC, וכן למחקרים פונקציונליים על עיבוד והצגת אנטיגנים. הפרופיל הגנטי המוגדר היטב שלו מאפשר מחקרים השוואתיים עם הפלוטיפים אחרים של MHC, ומסייע בזיהוי וריאנטים של סיכון למחלות ויעדים טיפוליים פוטנציאליים. בנוסף, קו התאים מעורב בהערכת טכנולוגיות ריצוף וגנוטיפ חדשות, ומשמש כנקודת ייחוס סטנדרטית במחקרים אימונוגנטיים.
- Tissue
- דם היקפי
- Disease
- לימפומה מסוג ברקיט
- Synonyms
- LCL (DR3)
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- תאים עגולים
- Cell type
- לימפוציט B
04Identifiers
- Citation
- COX (מספר קטלוגי Cytion 302138)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_E534
05Expression and susceptibility
- Viruses
- השתנה על ידי EBV
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS מנוטרל בחום
- Subculturing
- הומוגניזציה עדינה של תמיסת התאים בבקבוק באמצעות פיפטה למעלה ולמטה, ולאחר מכן לקיחת דגימה מייצגת כדי לקבוע את צפיפות התאים למ"ל. דילול התמיסה כדי להשיג ריכוז תאים של 1 x 105 תאים/מ"ל עם מצע תרבית טרי, וחלוקת התמיסה המותאמת לבקבוקים חדשים להמשך התרבית.
- Seeding density
- 5 x 105 תאים/סמ"ר
- Post-thaw recovery
- לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 105 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- גיל לא צוין
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
.jpg)