01General information
- Description
La línea celular COX es una línea celular linfoblastoide B (B-LCL) de referencia, derivada de un donante humano y transformada con el virus de Epstein-Barr (VEB). Se utiliza con frecuencia en investigaciones de inmunogenética e histocompatibilidad debido a su inclusión en los paneles del Grupo de Trabajo Internacional de Histocompatibilidad (IHWG). La línea celular COX representa un haplotipo específico del complejo mayor de histocompatibilidad (MHC), HLA-A1-B8-Cw7-DR3-DQ2, asociado con la susceptibilidad a enfermedades autoinmunes como la diabetes tipo 1, el lupus eritematoso sistémico y la miastenia gravis. Este haplotipo se destaca por su alto grado de desequilibrio de ligamiento, lo que convierte a la línea celular en un modelo esencial para estudiar las asociaciones genéticas relacionadas con el MHC.
La secuencia genómica del haplotipo COX se ha caracterizado por completo como parte del Proyecto de Haplotipos del MHC. Abarca aproximadamente 4,8 Mb, incluyendo las regiones de clase I, II y III del MHC, así como la región extendida de clase I. La secuenciación detallada reveló más de 16 000 polimorfismos de un solo nucleótido (SNP) y numerosas variaciones estructurales, lo que proporcionó información sobre la arquitectura genética de esta región. La caracterización exhaustiva del MHC de la línea celular COX la convierte en un recurso clave para comprender la función del sistema inmunológico y la base genética de las enfermedades asociadas al HLA.
En la investigación, la línea celular COX se utiliza para el mapeo de alta resolución de los loci asociados a enfermedades dentro del MHC, así como para estudios funcionales sobre el procesamiento y la presentación de antígenos. Su perfil genético bien definido permite realizar estudios comparativos con otros haplotipos del MHC, lo que ayuda a identificar variantes de riesgo de enfermedad y posibles dianas terapéuticas. Además, la línea celular se utiliza en la evaluación de nuevas tecnologías de secuenciación y genotipado, sirviendo como referencia estándar en estudios inmunogenéticos.
- Tissue
- Sangre periférica
- Disease
- Linfoma de Burkitt
- Synonyms
- LCL (DR3)
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- Células redondas
- Cell type
- Linfoblasto B
04Identifiers
- Citation
- COX (número de catálogo de Cytion 302138)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_E534
05Expression and susceptibility
- Viruses
- Transformado por el VEB
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, con 2,0 mM de glutamina estable y 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de suero fetal bovino (FBS) inactivado por calor
- Subculturing
- Homogeneice suavemente la suspensión celular en el matraz pipeteando de arriba hacia abajo; luego, tome una muestra representativa para determinar la densidad celular por ml. Diluya la suspensión con medio de cultivo fresco hasta alcanzar una concentración celular de 1 × 10⁵ células/ml, y divida la suspensión ajustada en alícuotas en matraces nuevos para continuar con el cultivo.
- Seeding density
- 5 × 105 células/cm²
- Post-thaw recovery
- Después de descongelarlas, siembre las células a una densidad de 5 × 10⁵ células/cm² y deje que se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
08Donor
- Donor age
- Edad no especificada
- Ethnicity
- caucásico
09Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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