Pāriet uz saturu
COX
Audums
Perifērās asinis
Slimība
Burkita limfoma
Sinonīmi
LCL (DR3)

Dokumenti

COX

Cell line · Preces numurs 302138

COX šūnu līnija ir etalona B-limfoblastoīda šūnu līnija (B-LCL), kas iegūta no cilvēka donora un transformēta ar Epšteina-Barra vīrusu (EBV). Tā bieži...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

COX šūnu līnija ir references B-limfoblastoīdu šūnu līnija (B-LCL), kas iegūta no cilvēka donora un transformēta ar Epšteina-Barra vīrusu (EBV). To bieži izmanto imūnģenētikā un histokompatibilitātes pētījumos, jo tā ir iekļauta Starptautiskās histokompatibilitātes darba grupas (IHWG) paneļos. COX šūnu līnija pārstāv īpašu galvenā histokompatibilitātes kompleksa (MHC) haplotipu HLA-A1-B8-Cw7-DR3-DQ2, kas saistīts ar uzņēmību pret autoimūnām slimībām, piemēram, 1. tipa diabētu, sistēmisko sarkano vilkēdi un myasthenia gravis. Šis haplotips izceļas ar augstu sasaistes nevienlīdzības pakāpi, padarot šūnu līniju par būtisku modeli ar MHC saistīto ģenētisko asociāciju izpētei.

COX haplotipa genomiskā secība ir pilnībā raksturota MHC haplotipu projekta ietvaros. Tas aptver aptuveni 4,8 Mb, aptverot MHC I, II un III klases reģionus, kā arī paplašināto I klases reģionu. Detalizētā sekvenēšana atklāja vairāk nekā 16 000 viena nukleotīda polimorfismu (SNP) un daudzas strukturālas variācijas, sniedzot ieskatu šī reģiona ģenētiskajā arhitektūrā. COX šūnu līnijas visaptverošais MHC raksturojums padara to par galveno resursu, lai izprastu imūnsistēmas funkcijas un ar HLA saistīto slimību ģenētisko pamatu.

Pētniecībā COX šūnu līniju izmanto ar slimībām saistīto MHC lokusu precīzai kartēšanai, kā arī funkcionāliem antigēnu apstrādes un prezentācijas pētījumiem. Tās labi definētais ģenētiskais profils ļauj veikt salīdzinošus pētījumus ar citiem MHC haplotipiem, palīdzot noteikt slimību riska variantus un potenciālos terapeitiskos mērķus. Turklāt šī šūnu līnija ir iesaistīta jaunu sekvencēšanas un genotipēšanas tehnoloģiju novērtēšanā, kalpojot par standarta etalonu imūnģenētiskajos pētījumos.

Audums
Perifērās asinis
Slimība
Burkita limfoma
Sinonīmi
  • LCL (DR3)

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Apaļas šūnas
Šūnu tips
B limfoblasts

04Identifikatori

Atsauce
COX (Cytion kataloga numurs 302138)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_E534

05Pazīmes un uzņēmība

Vīrusi
Pārveidots ar EBV

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% termiski inaktivētu FBS
Pārstādīšana
Viegli homogenizējiet šūnu suspensiju kolbā, pipetējot uz augšu un uz leju, pēc tam ņemiet reprezentatīvu paraugu, lai noteiktu šūnu blīvumu uz ml. Atšķaidiet suspensiju, lai sasniegtu šūnu koncentrāciju 1 x 105 šūnas/ml ar svaigu kultūras barotni, un sadaliet pielāgoto suspensiju jaunās kolbās turpmākai kultivēšanai.
Sēšanas blīvums
5 x 105 šūnas/cm2
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 105 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Vecums nav precizēts
Etniskā piederība
Kaukāzietis