Siirry sisältöön
COX
Kudos
Perifeerinen veri
Sairaus
Burkittin lymfooma
Synonyymit
LCL (DR3)

Asiakirjat

COX

Cell line · Tuotenumero 302138

COX-solulinja on ihmisluovuttajalta peräisin oleva ja Epstein-Barr-viruksella (EBV) transformoitu B-lymfoblastoidinen vertailusolulinja (B-LCL). Se on yleinen...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

COX-solulinja on ihmisen luovuttajasta peräisin oleva B-lymfoblastoidinen solulinja (B-LCL), joka on muunnettu Epstein-Barr-viruksella (EBV). Sitä käytetään usein immunogenetiikassa ja histokompatibiliteettitutkimuksissa, koska se kuuluu kansainvälisen histokompatibiliteettityöryhmän (IHWG) paneeleihin. COX-solulinja edustaa tiettyä päähistokompatibiliteettikompleksin (MHC) haplotyyppiä HLA-A1-B8-Cw7-DR3-DQ2, joka liittyy alttiuteen autoimmuunisairauksille, kuten tyypin 1 diabetekselle, systeemiselle lupus erythematosukselle ja myasthenia gravisille. Tämä haplotyyppi on merkittävä sen korkean linkitysepätasapainoasteen vuoksi, mikä tekee solulinjasta olennaisen tärkeän mallin MHC:hen liittyvien geneettisten yhteyksien tutkimiseen.

COX-haplotyypin genominen sekvenssi on täysin karakterisoitu osana MHC-haplotyyppihanketta. Se kattaa noin 4,8 Mb:n alueen, joka käsittää MHC:n luokan I, II ja III alueet sekä laajennetun luokan I alueen. Yksityiskohtainen sekvensointi paljasti yli 16 000 yksittäisen nukleotidin polymorfismia (SNP) ja lukuisia rakenteellisia vaihteluita, jotka tarjoavat tietoa tämän alueen geneettisestä rakenteesta. COX-solulinjan kattava MHC-luonnehdinta tekee siitä keskeisen resurssin immuunijärjestelmän toiminnan ja HLA-assosioituneiden sairauksien geneettisen perustan ymmärtämisessä.

Tutkimuksessa COX-solulinjaa käytetään MHC:n sairauksiin liittyvien lokusten hienokartoitukseen sekä antigeenien prosessointia ja esittämistä koskeviin toiminnallisiin tutkimuksiin. Sen hyvin määritelty geneettinen profiili mahdollistaa vertailututkimukset muiden MHC-haplotyyppien kanssa, mikä auttaa tunnistamaan sairauden riskivariantteja ja mahdollisia terapeuttisia kohteita. Lisäksi solulinja osallistuu uusien sekvensointi- ja genotyypinmääritystekniikoiden arviointiin, ja se toimii vakioreferenssinä immunogeneettisissä tutkimuksissa.

Kudos
Perifeerinen veri
Sairaus
Burkittin lymfooma
Synonyymit
  • LCL (DR3)

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
2

03Ominaisuudet

Morfologia
Pyöreät kennot
Solutyyppi
B-lymfoblasti

04Tunnisteet

Lähdeviite
COX (Cytionin luettelonumero 302138)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_E534

05Ilmentyminen ja alttius

Virukset
EBV:n muuntama

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % lämpöinaktivoidulla FBS:llä
Soluviljely
Homogenoi solususpensio varovasti pullossa pipetoimalla ylös ja alas, ota sitten edustava näyte solutiheyden määrittämiseksi millilitraa kohti. Laimenna suspensio tuoreella viljelyalustalla solupitoisuudeksi 1 x 105 solua/ml ja jaa säädetty suspensio uusiin pulloihin jatkokäsittelyä varten.
Kylvötiheys
5 x 105 solua/cm2
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 105 solua/cm2 ja anna solujen toipua jäädyttämisprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Ikä määrittelemätön
Etnisyys
Kaukasialainen