Ga naar de inhoud
COX
Weefsel
Perifeer bloed
Ziekte
Burkitt lymfoom
Synoniemen
LCL (DR3)

Documenten

COX

Cell line · Productnummer 302138

De COX-cellijn is een referentie-B-lymfoblastoïde cellijn (B-LCL) die afkomstig is van een menselijke donor en getransformeerd is met het Epstein-Barr-virus (EBV). Deze wordt vaak...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De COX-cellijn is een referentie B-lymfoblastoïde cellijn (B-LCL) afkomstig van een menselijke donor en getransformeerd met Epstein-Barr virus (EBV). Ze wordt vaak gebruikt in immunogenetica en histocompatibiliteitsonderzoek omdat ze is opgenomen in de panels van de International Histocompatibility Working Group (IHWG). De COX cellijn vertegenwoordigt een specifiek major histocompatibility complex (MHC) haplotype, HLA-A1-B8-Cw7-DR3-DQ2, geassocieerd met gevoeligheid voor auto-immuunziekten zoals type 1 diabetes, systemische lupus erythematosus en myasthenia gravis. Dit haplotype valt op door de hoge mate van linkage disequilibrium, waardoor de cellijn een essentieel model is voor het bestuderen van MHC-gerelateerde genetische associaties.

De genoomsequentie van het COX haplotype is volledig gekarakteriseerd als onderdeel van het MHC Haplotype Project. Het omvat ongeveer 4,8 Mb en omvat de klasse I, II en III regio's van de MHC, evenals de uitgebreide klasse I regio. Gedetailleerde sequentiebepaling onthulde meer dan 16.000 single nucleotide polymorfismen (SNP's) en talloze structurele variaties, wat inzicht geeft in de genetische architectuur van deze regio. De uitgebreide MHC-karakterisering van de COX cellijn maakt het een belangrijke bron voor het begrijpen van de functie van het immuunsysteem en de genetische basis van HLA-geassocieerde ziekten.

In onderzoek wordt de COX cellijn gebruikt voor het nauwkeurig in kaart brengen van ziekte-geassocieerde loci binnen het MHC en voor functionele studies naar antigeenverwerking en -presentatie. Het goed gedefinieerde genetische profiel maakt vergelijkende studies met andere MHC haplotypes mogelijk, wat helpt bij de identificatie van risicovarianten voor ziekten en potentiële therapeutische doelwitten. Daarnaast is de cellijn betrokken bij de evaluatie van nieuwe sequentie- en genotyperingstechnologieën en dient het als standaardreferentie in immunogenetische studies.

Weefsel
Perifeer bloed
Ziekte
Burkitt lymfoom
Synoniemen
  • LCL (DR3)

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
2

03Kenmerken

Morfologie
Ronde cellen
Celtype
B lymfoblast

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
COX (Cytion catalogusnummer 302138)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_E534

05Expressie en vatbaarheid

Virussen
Getransformeerd door EBV

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% hitte-geïnactiveerde FBS
Heruitplanten
Homogeniseer de celsuspensie in de kolf voorzichtig door op en neer te pipetteren en neem vervolgens een representatief monster om de celdichtheid per ml te bepalen. Verdun de suspensie tot een celconcentratie van 1 x 105 cellen/ml met vers kweekmedium en verdeel de aangepaste suspensie in nieuwe kolven voor verdere kweek.
Zaaidichtheid
5 x 105 cellen/cm2
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, zaai de cellen uit op 5 x 105 cellen/cm2 en laat de cellen minstens 24 uur herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
Leeftijd onbepaald
Etnische afkomst
Kaukasisch