Přejít na obsah
COX
Tkáň
Periferní krev
Nemoc
Burkittův lymfom
Synonyma
LCL (DR3)

Dokumenty

COX

Cell line · Číslo výrobku 302138

Buněčná linie COX je referenční B-lymfoblastoidní buněčná linie (B-LCL) odvozená od lidského dárce a transformovaná virem Epstein-Barrovým (EBV). Často se...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie COX je referenční B-lymfoblastická buněčná linie (B-LCL) odvozená od lidského dárce a transformovaná virem Epsteina-Barrové (EBV). Je často používána v imunogenetice a výzkumu histokompatibility díky svému zařazení do panelů Mezinárodní pracovní skupiny pro histokompatibilitu (IHWG). Buněčná linie COX reprezentuje specifický haplotyp hlavního histokompatibilního komplexu (MHC), HLA-A1-B8-Cw7-DR3-DQ2, spojený s náchylností k autoimunitním onemocněním, jako je diabetes 1. typu, systémový lupus erythematodes a myasthenia gravis. Tento haplotyp se vyznačuje vysokým stupněm vazebné nerovnováhy, což z buněčné linie činí základní model pro studium genetických asociací souvisejících s MHC.

Genomická sekvence haplotypu COX byla kompletně charakterizována v rámci projektu MHC Haplotype Project. Rozkládá se na ploše přibližně 4,8 Mb a zahrnuje oblasti MHC I., II. a III. třídy a také rozšířenou oblast I. třídy. Podrobné sekvenování odhalilo více než 16 000 jednonukleotidových polymorfismů (SNP) a četné strukturální odchylky, což umožnilo nahlédnout do genetické architektury této oblasti. Komplexní charakterizace MHC buněčné linie COX z ní činí klíčový zdroj pro pochopení funkce imunitního systému a genetického základu chorob spojených s HLA.

Ve výzkumu se buněčná linie COX používá k jemnému mapování lokusů v rámci MHC souvisejících s nemocemi a také k funkčním studiím zpracování a prezentace antigenů. Její dobře definovaný genetický profil umožňuje srovnávací studie s jinými haplotypy MHC, což napomáhá identifikaci rizikových variant onemocnění a potenciálních terapeutických cílů. Kromě toho se tato buněčná linie podílí na hodnocení nových technologií sekvenování a genotypování a slouží jako standardní reference v imunogenetických studiích.

Tkáň
Periferní krev
Nemoc
Burkittův lymfom
Synonyma
  • LCL (DR3)

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Odpružení
Úroveň biologické bezpečnosti
2

03Charakteristika

Morfologie
Kulaté buňky
Typ buňky
B lymfoblast

04Identifikátory

Citace
COX (katalogové číslo Cytion 302138)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_E534

05Exprese a náchylnost

Viry
Transformované EBV

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % tepelně inaktivovaného FBS
Subkultivace
Jemně homogenizujte buněčnou suspenzi v baňce pipetováním nahoru a dolů, poté odeberte reprezentativní vzorek pro stanovení buněčné hustoty na ml. Suspenzi zřeďte čerstvým kultivačním médiem tak, aby koncentrace buněk byla 1 x 105 buněk/ml, a upravenou suspenzi rozdělte do nových baňek pro další kultivaci.
Hustota výsevu
5 x 105 buněk/cm2
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 105 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
Věk nespecifikován
Etnická příslušnost
Kavkazský